| 研究課題/領域番号 |
20K07851
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| 研究機関 | 鹿児島大学 |
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研究代表者 |
赤崎 雄一 鹿児島大学, 医歯学域鹿児島大学病院, 助教 (00631920)
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| 研究分担者 |
池田 義之 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 准教授 (00573023)
窪薗 琢郎 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 講師 (00598013)
大石 充 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 教授 (50335345)
徳重 明央 鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 特任講師 (70780287)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 心不全 / 骨格筋萎縮 / 抗癌剤 / ミトコンドリア / マイトファジー |
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| 研究実績の概要 |
オルタナティブオートファジーの低下がドキソルビシンによる心筋障害および骨格筋障害の分子機序に関与することを明らかにし、治療方法確立を目指すことを目的として研究計画を立てた。A.基礎実験：(I) in vitro：H9c2ラット心筋芽細胞およびマウス骨格筋由来筋芽細胞株 C2C12 細胞を用いて以下の実験を行った。
（I）H9c2細胞およびC2C12細胞に、ドキソルビシンを投与し、H9c2細胞およびC2C12細胞の分化・増殖を評価した。C2C12細胞の分化・増殖については、抑制されていることが観察された。H9c2細胞についても分化・増殖については、抑制されていることが観察された。ミトコンドリアをMito-tracker Red Stainingにおいて観察した。C2C12細胞においては、分裂したミトコンドリアの増加を認めており、fissionに傾いていることが確認された。H9c2細胞においても同様に、分裂したミトコンドリアの増加を認めており、fissionに傾いていることが確認された。(II) in vivo：正常マウスC57BL6（WT）を用いて、ドキソルビシン心筋障害モデルを作成した。(II)-1.生理学的変化の検討；WTマウス(12週齢)に対して、ドキソルビシン投与を行う。投与4週間後において非投与群と心機能を比較検討した。ドキソルビシン投与群においては、左室拡大を認め、左室駆出力の低下を認めた。電子顕微鏡では、心筋において、分裂したミトコンドリア像の増加を認めており、fissionが増加していると考えられた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
ドキソルビシンを投与し、4週間後の心機能について評価を行った。同一マウスは、4週間では心不全を生じており、消耗していることから、心機能評価や骨格筋評価により死亡をするマウスもいるため、マウスの数を増やして、同様の実験を繰り返す必要があると考えられる。
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| 今後の研究の推進方策 |
in vitro実験においては、形態学的な評価のみならず、ATP産生能やComplex assay等でミトコンドリア機能を評価行う予定にしている。さらにLC3、p62、Ulk1、Beclin1、Rab9、Lamp2 等のImmunoblotや免疫組織化学染色を施行し、コンベンショナルオートファジー（Con. Autoph.）とオルタナティブオートファジー（Alt. Autoph.）を評価する。
ドキソルビシンを投与し、4週間後の心機能について評価を行った。同一マウスは、4週間では心不全を生じており、消耗していることから、骨格筋については、異なるタイミングでの評価が必要と考えられる。骨格筋機能、ミトコンドリアの評価にあたり、2週間後、4週間後において評価を行い、相互に影響しする条件を検討中である。
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