| 研究実績の概要 |
今年度は、安定同位体セシウム（Cesium；Cs）添加時の細胞毒性評価とインフルエンザウイルス（IAV）の増殖に及ぼす影響を検討した。細胞毒性評価はMTT（3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide）assayを用いた。MEM培地にCsClを０, 0.1, 0.3，1, 3, 10, 30mMで添加した場合の吸光度（A570- A650）で評価し、A549細胞とHEK293T細胞で検討を行った。添加48時間後ではCsCl 添加 0.1～3ｍＭの生細胞率はA549細胞とHEK293T細胞のいずれも80％を超えていた（CsCl (-)を100％とした場合）。しかし、CsCl 10mMを超えると著しい細胞障害が認められた。次に、細胞障害を起こさない低濃度のＣsＣl添加時(0, 0.1, 0.5, 1ｍM)のポリメラーゼ活性への影響を検討するために、インフルエンザウイルスのミニゲノムアッセイ（pCAGGS-PB2,PB1,PA, NP (A/WSN/1933(H1N1))とNP分節NCRを持つルシフェラーゼ遺伝子をコードするpPolI-NP(0)Fluc(0) をHEK293T細胞にトランスフェクションし、転写・翻訳されるルシフェラーゼを測定）を行った。Relative Luciferase Activityは、CsCl 0ｍMを1とした場合、0.1ｍM 1.47、0.5ｍM 1.14、1ｍM 1.14（mean）であり有意差は認められなかった。このことから低濃度CsCｌ添加は、IAVのポリメラーゼ活性には影響を及ぼさないと考えられた。
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