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当初「SAMD9遺伝子の変異がサイトカインの産生に影響を及ぼすか否かを明らかにする」ことを本研究のゴールの１つとしていたが、昨年度までに影響を及ぼすことが明らかな結果を得ることができた。そこで今年度は、サイトカイン産生に異常をもたらす分子メカニズムの解明に迫れるよう研究を進めた。
SAMD9遺伝子に変異を持つMIRAGE症候群の ①疾患特異的iPS細胞を樹立した。①に対する野生型のアイソジェニックコントロールとして、変異遺伝子を修復した ②遺伝子修復iPS細胞を作製した。①と②のiPS細胞をいずれも単球に分化させ、この段階で株化したiPS-ML細胞（iPSC-derived Myeloid cell Line）を準備した。次に、iPS-ML細胞をマクロファージ様の細胞（iPS-MP細胞；iPS-ML-derived Macrophage）に分化誘導した後、このiPS-MP細胞をサイトカインの誘導因子で刺激して、サイトカインの産生能を評価した。
その結果、疾患特異的iPS-MP細胞の培養上清において、遺伝子修復iPS-MP細胞とは産生動態が異なり高い値を示す炎症性サイトカインがあることを見出した。実際、MIRAGE症候群の患者血清を用いたサイトカイン濃度の測定結果からも、今回、疾患特異的iPS-MP細胞の培養上清で高値を示した炎症性サイトカインが、同様に高い値で検出された患者も数名いた。高い値を示した炎症性サイトカインは、遺伝子発現においてもRT-qPCRの結果から疾患特異的iPS-MP細胞で上昇しており、それと共にSAMD9遺伝子の発現も遺伝子修復iPS-MP細胞より高い値を示した。患者は、様々な治療を受けており、その影響から本来の高い値が隠されている可能性を考慮すると、この高値を示した炎症性サイトカインは、SAMD9遺伝子変異がもたらすものであることを示唆するものである。
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