| 研究課題/領域番号 |
20K08275
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| 研究機関 | 筑波大学 |
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研究代表者 |
星 拓男 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (10375503)
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| 研究分担者 |
柳川 徹 筑波大学, 医学医療系, 教授 (10312852)
岡田 浩介 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (80757526)
正田 純一 筑波大学, 医学医療系, 教授 (90241827)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 非アルコール性脂肪性肝炎 / 脂肪酸代謝 / p62 |
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| 研究実績の概要 |
p62が肝細胞，または脂肪細胞にのみ特異的に発現する（レスキューされる）組織細胞特異的p62レスキューマウスと全身p62遺伝子欠失マウス（p62-KO）に，60%高脂肪食（オリエンタル酵母）を4から16週間摂餌させ，NASH重症度を肝病理（steatosis, activity, fibrosis score; SAF score），血液生化学検査，肝組織のqPCR，immunoblot解析により評価した．この3系統のマウスは，いずれも高脂肪食摂餌によって高度肥満を呈したが，遺伝子型によって体重に差は認められなかった．一方，p62-KO，脂肪細胞特異的p62レスキューマウス（p62-A res）は，高度の炎症線維化を伴う重症NASHへ進展したが，肝細胞特異的p62レスキューマウス（p62-H res）のみで，肝炎症，肝線維化が抑制され，NASHの進行が軽減していた．血液生化学検査でも，p62-H resではASTおよびALTが他の2系統と比較して低値であり，肝障害が抑制されていた．qPCRでは，病理組織学的解析と同様に，p62-H resでのみ肝炎症および線維化シグナルが抑制されていた．また，脂質過酸化に関与するUCP-2の発現もp62-H resで低値であった．
一度肝細胞に蓄積した中性脂肪の”抜けやすさ”を解析するため，p62-KOマウスに
8週間高脂肪食を摂餌させたのち，1日3gの通常食（マウスの通常の1日摂食量相当）に制限して4週間飼育した．この結果，p62-KOでも肝組織の脂肪蓄積は消失し，肝炎症および線維化もほぼ認められず，p62遺伝子欠失による肝臓病態は，少なくとも不可逆なものではないことが示唆された．
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
遺伝子改変動物の実験および解析は，ほぼ計画通りに進行している．今後も更なる解析を行う．
最終年度は，細胞実験を強力に推し進める計画である．
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| 今後の研究の推進方策 |
遺伝子改変マウスについては，脂肪酸代謝とlipophagyに着目した解析を継続する．
細胞実験については，脂肪酸負荷による代謝の変化をp62の発現の有無によって比較し，p62の脂肪酸代謝における役割を探求する．また，細胞外フラックスアナライザーを用いて，肝細胞のミトコンドリア機能に着目した解析を計画している．
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