allograftマウスモデルによる肝細胞癌の癌免疫逃避機構の解明

2021 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 20K08276
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 千葉 哲博 千葉大学, 大学院医学研究院, 講師 (00381583)
• 研究分担者: 金山 健剛 千葉大学, 医学部附属病院, 医員 (20835102)
• 研究期間 (年度): 2020-04-01 – 2023-03-31
• キーワード: 腫瘍微小環境

研究実績の概要

同系マウスの皮下へ移植（同種異所性移植モデル）による腫瘍微小環境の免疫学的解析を行目的とし、Hepa1-6細胞のC57BL/6マウス、H22細胞のBalb/cマウスへの皮下移植の系を作成した。移植後数週間にわたって担癌マウスの腫瘍増大をモニターするとともに、腫瘍組織をコラゲナーゼ分離により分散し、比重遠心法および磁気細胞分離法により腫瘍細胞、血管内皮細胞、免疫担当細胞（細胞障害性T細胞、制御性T細胞、NK細胞、M2マクロファージなど）の単離ができるようになった。さらにフローサイトメトリーを用いてこれらの腫瘍組織内の各細胞分画の詳細な解析を行った。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

COVID-19の影響により海外からの試薬類などの購入に時間を要したため、多少の遅れが生じている。

今後の研究の推進方策

腫瘍微小環境の評価として、サイトカインアレイを用いてIFN-γ, TNF-alpha、VEGFなどのサイトカイン濃度を網羅的に測定する。また、マルチキナーゼ阻害剤、VEGF阻害剤、EZH2阻害剤を単独投与または免疫チェックポイント阻害剤と併用投与し、抗腫瘍効果を検討するとともに、微小環境構成細胞の変化を評価する。

次年度使用額が生じた理由

物品費が予想より若干少なかったため、1091円の次年度使用額が生じた。比較的少額であり、次年度の予算と合わせて問題なく執行予定である。

研究成果

• [雑誌論文] EZH1/2 inhibition augments the anti-tumor effects of sorafenib in hepatocellular carcinoma. (2021)
  • 著者名/発表者名: Kusakabe Y, Chiba T, Oshima M, Koide S, Rizq O, Ao J, Kaneko T, Kanzaki H, Kanayama K, Maeda T, Saito T, Nakagawa R, Kobayashi K, Kiyono S, Nakamura M, Ogasawara S, Suzuki E, Nakamoto S, Yasui S, Mikata R, Muroyama R, Kanda T, Maruyama H, Kato J, Mimura N, Ma A, Jin J, Zen Y, Otsuka M, Kaneda A, Iwama A, Kato N.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 11 ページ: 21396
  • DOI: 10.1038/s41598-021-00889-0.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Human hepatocyte-derived extracellular vesicles attenuate the carbon tetrachloride-induced acute liver injury in mice (2021)
  • 著者名/発表者名: Kakizaki M, Yamamoto Y, Nakayama S, Kameda K, Nagashima E, Ito M, Suyama T, Matsuzaki Y, Chiba T, Sumiyoshi H, Inagaki Y, Kotani A.
  • 雑誌名: Cell Death Dis. 巻: 12 ページ: 1010
  • DOI: 10.1038/s41419-021-04204-7.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Genetic profiles of Barrett's esophagus and esophageal adenocarcinoma in Japanese patients (2021)
  • 著者名/発表者名: Tokunaga M, Okimoto K, Akizue N, Ishikawa K, Hirotsu Y, Amemiya K, Ota M, Matsusaka K, Nishimura M, Matsushita K, Ishikawa T, Nagashima A, Shiratori W, Kaneko T, Oura H, Kanayama K, Ohta Y, Taida T, Saito K, Matsumura T, Chiba T, Mochizuki H, Arai M, Kato J, Ikeda JI, Omata M, Kato N.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 11 ページ: 17671
  • DOI: 10.1038/s41598-021-97249-9.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Diagnostic value of IMP3 and p53 immunohistochemical staining in EUS-guided fine-needle aspiration for solid pancreatic tumors (2021)
  • 著者名/発表者名: Mikata R, Yasui S, Kishimoto T, Kouchi Y, Shingyoji A, Senoo J, Takahashi K, Nagashima H, Kusakabe Y, Ohyama H, Ohno I, Sugiyama H, Chiba T, Kato J, Kato N.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 11 ページ: 17257
  • DOI: 10.1038/s41598-021-96492-4.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Comprehensive mutational analysis of background mucosa in patients with Lugol-voiding lesions (2021)
  • 著者名/発表者名: Akizue N, Okimoto K, Arai M, Hirotsu Y, Amemiya K, Oura H, Kaneko T, Tokunaga M, Ishikawa K, Ohta Y, Taida T, Saito K, Maruoka D, Matsumura T, Nakagawa T, Nishimura M, Chiba T, Matsushita K, Mochizuki H, Yokosuka O, Omata M, Kato N.
  • 雑誌名: Cancer Med. 巻: 10 ページ: 3545-3555
  • DOI: 10.1002/cam4.3905.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Analysis of circulating cell-free DNA after endoscopic ultrasound-guided fine needle aspiration in pancreatic ductal adenocarcinoma (2021)
  • 著者名/発表者名: Asano K, Mikata R, Chiba T, Kan M, Maruta S, Yamada T, Miura Y, Shima Y, Sensui M, Nagashima H, Yokoyama M, Ohyama H, Kusakabe Y, Yasui S, Sugiyama H, Ohno I, Kato J, Takano S, Ohtsuka M, Kato N.
  • 雑誌名: Pancreatology. 巻: S1424 ページ: 3903
  • DOI: 10.1016/j.pan.2021.04.001.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum Angiopoietin 2 acts as a diagnostic and prognostic biomarker in hepatocellular carcinoma (2021)
  • 著者名/発表者名: Ao J, Chiba T, Kanzaki H, Kanayama K, Shibata S, Kurosugi A, Iwanaga T, Kan M, Sakuma T, Qiang N, Ma Y, Kojima R, Kusakabe Y, Nakamura M, Kobayashi K, Kiyono S, Kanogawa N, Saito T, Nakagawa R, Kondo T, Ogasawara S, Suzuki E, Nakamoto S, Muroyama R, Tawada A, Kato J, Kanda T, Maruyama H, Kato N.
  • 雑誌名: J Cancer. 巻: 12 ページ: 2694-2701
  • DOI: 10.7150/jca.56436.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Acquisition of mesenchymal-like phenotypes and overproduction of angiogenic factors in lenvatinib-resistant hepatocellular carcinoma cells (2021)
  • 著者名/発表者名: Ao J, Chiba T, Shibata S, Kurosugi A, Qiang N, Ma Y, Kan M, Iwanaga T, Sakuma T, Kanzaki H, Kanayama K, Kojima R, Kusakabe Y, Nakamura M, Saito T, Nakagawa R, Kondo T, Ogasawara S, Suzuki E, Muroyama R, Kato J, Mimura N, Kanda T, Maruyama H, Kato N.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 549 ページ: 171-178
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2021.02.097.
  • 査読あり
• [雑誌論文] The impact of FGF19/FGFR4 signaling inhibition in antitumor activity of multi-kinase inhibitors in hepatocellular carcinoma (2021)
  • 著者名/発表者名: Kanzaki H, Chiba T, Ao J, Koroki K, Kanayama K, Maruta S, Maeda T, Kusakabe Y, Kobayashi K, Kanogawa N, Kiyono S, Nakamura M, Kondo T, Saito T, Nakagawa R, Ogasawara S, Suzuki E, Ooka Y, Muroyama R, Nakamoto S, Yasui S, Tawada A, Arai M, Kanda T, Maruyama H, Mimura N, Kato J, Zen Y, Ohtsuka M, Iwama A, Kato N.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 11 ページ: 5303
  • DOI: 10.1038/s41598-021-84117-9.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] The combination of the tubulin binding small molecule PTC596 and proteasome inhibitors suppresses the growth of myeloma cells (2021)
  • 著者名/発表者名: Nagai Y, Mimura N, Rizq O, Isshiki Y, Oshima M, Rizk M, Saraya A, Koide S, Nakajima-Takagi Y, Miyota M, Chiba T, Oshima-Hasegawa N, Muto T, Tsukamoto S, Mitsukawa S, Takeda Y, Ohwada C, Takeuchi M, Iseki T, Nakaseko C, Lennox W, Sheedy J, Weetall M, Yokote K, Iwama A, Sakaida E.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 11 ページ: 2074
  • DOI: 10.1038/s41598-021-81577-x.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Role of FGF19/FGFR4 Signaling and Potential of Serum FGF19 as a Biomarker in Hepatocellular Carcinoma. (2021)
  • 著者名/発表者名: Chiba T
  • 学会等名: APASL Oncology 2021
  • 国際学会
• [学会発表] Impacts of EZH2 inhibitor UNC1999 on tumor and tumor microenvironment in hepatocellular carcinoma (2021)
  • 著者名/発表者名: Ao J, Chiba T, Kaneko T et al.
  • 学会等名: APASL Oncology 2021
  • 国際学会
• [学会発表] The effect of glucosylceramide synthase inhibitor on liver fibrosis regression (2021)
  • 著者名/発表者名: Iwanaga T, Chiba T, Zhang J, et al.
  • 学会等名: APASL Oncology 2021
  • 国際学会
• [学会発表] Effects of EZH2 inhibition on tumor and tumor microenvironment in hepatocellular carcinoma (2021)
  • 著者名/発表者名: Ao J, Chiba T, Kato N.
  • 学会等名: AASLD The Liver Meeting 2021
  • 国際学会
• [学会発表] Involvement of FGF and VEGF signaling in multi-kinase inhibitor resistance in hepatocellular carcinoma (2021)
  • 著者名/発表者名: Kanzaki H, Chiba T, Kato N.
  • 学会等名: AASLD The Liver Meeting 2021
  • 国際学会
• [学会発表] EZH2阻害剤の肝癌微小環境に与える影響の検討 (2021)
  • 著者名/発表者名: 敖俊杰, 千葉哲博, 加藤直也
  • 学会等名: JDDW 2021
• [学会発表] 血清Angiopoietin 2の肝細胞癌新規バイオマーカーとしての有用性 (2021)
  • 著者名/発表者名: 強娜, 千葉哲博, 敖俊杰, 他.
  • 学会等名: JDDW 2021
• [学会発表] 血清可溶型PD-L1のバイオマーカーとしての意義-アテゾリズマブ/ベバシズマブ併用症例を含めて- (2021)
  • 著者名/発表者名: 神﨑洋彰, 千葉哲博, 加藤直也
  • 学会等名: 第57回日本肝癌研究会
• [学会発表] 血清FGF19値に基づいた肝細胞癌に対するレンバチニブの後方治療時の成績 (2021)
  • 著者名/発表者名: 千葉哲博, 神﨑洋彰, 敖俊杰, 他.
  • 学会等名: 第57回日本肝癌研究会
• [学会発表] 肝細胞癌におけるGas6と可溶型Axlのバイオマーカーとしての有用性の検証 (2021)
  • 著者名/発表者名: 佐久間崇文, 千葉哲博, 加藤直也
  • 学会等名: 第57回 日本肝臓学会総会
• [学会発表] グルコシルセラミド合成酵素阻害薬の肝線維化抑制効果の検討 (2021)
  • 著者名/発表者名: 岩永光巨, 千葉哲博, 加藤直也
  • 学会等名: 第57回 日本肝臓学会総会
• [学会発表] マルチキナーゼ阻害剤耐性化におけるFGFシグナルとVEGFシグナルの関わり (2021)
  • 著者名/発表者名: 神﨑洋彰, 千葉哲博, 加藤直也
  • 学会等名: 第107回 日本消化器病学会総会
• [学会発表] 新規食餌誘導性非アルコール性脂肪性肝疾患マウスモデルの構築と病態解析 (2021)
  • 著者名/発表者名: 中村昌人, 千葉哲博, 加藤直也
  • 学会等名: 第107回 日本消化器病学会総会