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2021 年度 実績報告書

LPS暴露腸間膜由来血管内皮細胞がNAFLD病態形成に果たす役割の解明

研究課題

研究課題/領域番号 20K08301
研究機関藤田医科大学

研究代表者

西島 亜紀  藤田医科大学, 医学部, 講師 (40566105)

研究分担者 山本 洋平  秋田大学, 医学部附属病院, 助教 (70400512)
大森 泰文  秋田大学, 医学系研究科, 教授 (90323138)
研究期間 (年度) 2020-04-01 – 2022-03-31
キーワードNAFLD / エンドトキシン / 内臓脂肪組織 / 血管内皮細胞 / dysbiosis
研究実績の概要

10-12週齢ラットの腸間膜脂肪組織を無菌的に採取し、細切したのち、コラゲナーゼ消化、メッシュでろ過することで脂肪組織由来stromal vascular fraction (SVF)を単離した。SVFを継代した増加させたのち、ビーズ法を用いて血管内皮細胞を回収した。内皮細胞用培地を用いて脂肪組織由来血管内皮細胞(ATDECs)を培養した。昨年度に細胞障害が出ないことを確認した量(1 ng/ml)のlipopolysaccharide (LPS)を添加し、ATDECsのextracellular vesicles (EVs)を回収した。このLPS (+/-) ATDECs-EVsおよびconditioned mediaをラット内臓脂肪組織(VAT)器官培養の培地に添加し、標本作製し形態を観察した。コントロールと比較したが明らかな差異は見られなかった。免疫染色にてCD34, CD31, αSMA, CD45, CD68を行ったがこちらも有意な所見は得られなかった。また、この培養系で回収した上清を用いてadiponectin, leptinを測定(ELISA)したが、adipokinesの分泌量に変化は認められなかった。

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公開日: 2022-12-28  

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