| 研究実績の概要 |
1) Latent TGF-β を添加し，TGF-β シグナルおよび線維化関連タンパクの発現を評価した．各種阻害剤はすべて培養RDEBF のLatent TGF-β 活性化を抑制したが，とくにROS 阻害剤は抑制効果が高かった．またsiRNA を用いた検討では，インテグリンβ5 およびMMP-2とROSを阻害した際に強く抑制された．以上より，RDEBFにおいては主としてインテグリンβ5，MMP-2，ROS がLatent TGF-β 活性化に関与していると考えられた．
2) RDEB 角化細胞(RDEBK)の皮膚線維化に及ぼす影響を調べるため，RDEBF とRDEBK を三次元培養し3D-RDEB 培養皮膚モデルを作成した．各種阻害剤存在下でTGF-β シグナルおよび維化を評価した．RDEBK とRDEBF を共培養した際には，RDEBK と正常線維芽細胞，正常角化細胞とRDEBF という組み合わせと比較して，有意にRDEBK およびRDEBF におけるTGF-β 活性や線維化関連タンパクの発現が上昇していた．RDEB における線維化にはRDEBK とRDEBFの相互作用が重要な役割を果たしており,いずれかをcollection することで，重篤な線維化を抑制できる可能性が示唆された．
3) VII 型コラーゲンコーティング後にRDEBF を培養したところ，Latent TGF-βの活性化が抑制された．このころからVII 型コラーゲン自体が活性化因子の発現や機能を抑制することで，TGF-β シグナルを制御していると考えられた．
以上より，RDEBのの線維化には角化細胞と線維芽細胞のTGF-βシグナルを介した相互作用があり，特にMMPとROSの関与が大きいことが明らかになり，いずれかの細胞でMMPとROSを阻害することで線維化の抑制が可能性が示唆された．
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