血管増殖におけるVWF-HBDの同定と抑制型VEGFアイソフォームとの相互作用

2022 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20K08711
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 松下 正 名古屋大学, 医学部附属病院, 教授 (30314008)
• 研究分担者: 鈴木 伸明 名古屋大学, 医学部附属病院, 講師 (70637686) ; 菊地 良介 岐阜大学, 医学部附属病院, 臨床検査技師長 (30721435)
• 研究期間 (年度): 2020-04-01 – 2023-03-31
• キーワード: von Willebrand factor / von Willebrand disease / Type 3 / VEGF / angiogenesis

研究実績の概要

von Willebrand因子 (VWF)のヘパリン結合ドメインは成長因子(Growth factor: GF)に結合し、創傷治癒において血管新生を促進する。近年、VWFがヘパリンとの同じ結合様式で血管外マトリックスへ結合することにより、血管新生を調節することが示されており、止血以外のVWFの新たな重要な機能である可能性がある。本研究では同意を得て分離したVWD type 1、type 2A、type 3 各typeの患者単核球からBOECs(以後ECFCと呼称)を樹立した。
今年度は昨年度に引き続き血管内皮細胞におけるVWFの発現の有無が血管新生能に関与する可能性につきvon Willebrand病 （VWD）type 3(完全欠損型)症例由来ECFC（endothelial colony-forming cells）により検討した。Type 3 由来ECFCにヒトVWF血漿中同濃度 (10ug/mL) に相当する精製VWFを添加したが管腔形成能に大きな変化はなく、内皮細胞内のVWFの存在が重要であることが示唆された。さらに血管新生の評価を行うため、細胞遊走能（Scratch assay）、管腔形成能（Matrigel assay）を健常人由来ECFCやヒト臍帯静脈内皮細胞 (HUVEC)と比較した。Matrigel assayでは対照群に比して、Type3 VWD患者由来ECFCでは管腔形成能は全体的に低下していることが判明したが、管腔径や分岐の数は対照群よりも増加傾向にある場合があり、管腔形成過程の不均衡を生じていると考えられた。一方Scratch assayによる遊走能には大きな差は認めなかった。Type3 VWD患者の血管新生では管腔形成過程に生じる不均衡が血管ネットワークの形成に異常を生じ、血管異形成として表現されている可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] International consensus recommendations on the management of people with haemophilia B (2022)
  • 著者名/発表者名: Hart Daniel P.、Matino Davide、Astermark Jan、Dolan Gerard、d’Oiron Roseline、Hermans Cedric、Jimenez-Yuste Victor、Linares Adriana、Matsushita Tadashi、McRae Simon、Ozelo Margareth C.、Platton Sean、Stafford Darrel、Sidonio Robert F.、Tiede Andreas
  • 雑誌名: Therapeutic Advances in Hematology 巻: 13 ページ: -
  • DOI: 10.1177/20406207221085202
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] F9 mRNA splicing aberration due to a deep Intronic structural variation in a patient with moderate hemophilia B (2022)
  • 著者名/発表者名: Odaira Koya、Kawashima Fumika、Tamura Shogo、Suzuki Nobuaki、Tokoro Mahiru、Hayakawa Yuri、Suzuki Atsuo、Kanematsu Takeshi、Okamoto Shuichi、Takagi Akira、Katsumi Akira、Matsushita Tadashi、Shima Midori、Nogami Keiji、Kojima Tetsuhito、Hayakawa Fumihiko
  • 雑誌名: Thrombosis Research 巻: 213 ページ: 91～96
  • DOI: 10.1016/j.thromres.2022.03.010
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Periosteum-derived podoplanin-expressing stromal cells regulate nascent vascularization during epiphyseal marrow development (2022)
  • 著者名/発表者名: Tamura Shogo、Mukaide Masato、Katsuragi Yumi、Fujii Wataru、Odaira Koya、Suzuki Nobuaki、Tsukiji Nagaharu、Okamoto Shuichi、Suzuki Atsuo、Kanematsu Takeshi、Katsumi Akira、Takagi Akira、Ikeda Katsuhide、Ueyama Jun、Hirayama Masaaki、Suzuki-Inoue Katsue、Matsushita Tadashi、Kojima Tetsuhito、Hayakawa Fumihiko
  • 雑誌名: Journal of Biological Chemistry 巻: 298 ページ: 101833～101833
  • DOI: 10.1016/j.jbc.2022.101833
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] VWF‐Gly2752Ser, a novel non‐cysteine substitution variant in the CK domain, exhibits severe secretory impairment by hampering C‐terminal dimer formation (2022)
  • 著者名/発表者名: Okamoto Shuichi、Tamura Shogo、Sanda Naomi、Odaira Koya、Hayakawa Yuri、Mukaide Masato、Suzuki Atsuo、Kanematsu Takeshi、Hayakawa Fumihiko、Katsumi Akira、Kiyoi Hitoshi、Kojima Tetsuhito、Matsushita Tadashi、Suzuki Nobuaki
  • 雑誌名: Journal of Thrombosis and Haemostasis 巻: 20 ページ: 1784～1796
  • DOI: 10.1111/jth.15746
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 【血液疾患のすべて】出血・血栓性疾患 von Willebrand病 (2022)
  • 著者名/発表者名: 松下正
  • 雑誌名: 日本医師会雑誌 巻: 151巻特別1 ページ: S314-S316
• [学会発表] 出血性疾患の新しい治療 (2022)
  • 著者名/発表者名: 松下 正
  • 学会等名: 第23回検査血液学会
  • 招待講演
• [学会発表] Multimerの経時的変化が止血効果の指標となり得た後天性von Willebrand症候群の1例 (2022)
  • 著者名/発表者名: 岡本 修一, 鈴木 伸明, 兼松 毅, 鈴木 奈瑠子, 鈴木 敦夫, 清井 仁, 松下 正
  • 学会等名: 第44回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] Endothelial colony forming cells(ECFCs)の安定した樹立を目指して (2022)
  • 著者名/発表者名: 岡本 修一, 鈴木 伸明, 田村 彰吾, 鈴木 敦夫, 大平 晃也, 兼松 毅, 鈴木 奈瑠子, 清井 仁, 松下 正
  • 学会等名: 第70回日本輸血・細胞治療学会学術総会
• [学会発表] 出血性疾患に対する新しい治療 (2022)
  • 著者名/発表者名: 松下 正
  • 学会等名: 第70回日本輸血・細胞治療学会学術総会
  • 招待講演
• [学会発表] 出血性疾患への適切なアプローチ (2022)
  • 著者名/発表者名: 松下 正
  • 学会等名: 第67回内科学会北海道支部生涯教育講演会
  • 招待講演