難治性急性リンパ性白血病におけるクローン解析に基づく発症・再発様式の解明

2021 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 20K08723
• 研究機関: 独立行政法人国立病院機構(名古屋医療センター臨床研究センター)
• 研究代表者: 真田 昌 独立行政法人国立病院機構(名古屋医療センター臨床研究センター), その他部局等, 高度診断研究部長 (20529044)
• 研究期間 (年度): 2020-04-01 – 2023-03-31
• キーワード: 急性リンパ性白血病 / 遺伝子再構成 / クローン変化 / 微小残存病変

研究実績の概要

JPLSG（日本小児白血病リンパ腫研究グループ）で乳児白血病を対象に行われたMLL-10研究登録例のうち、KMT2A（MLL）転座陽性例を対象に、次世代シーケンサー（NGS）により同定されたKMT2A転座の切断点配列に相補的なプライマーを用いたdroplet-digital PCR(ddPCR)による正確なクローンサイズの測定を行った。同症例で同定されたIGHのVDJまたはDJ再構成についてもddPCRによるサイズ評価を行うことで、クローン構造を明らかにした。評価可能であった53例中、26例はKMT2A転座を有する、ほぼすべての細胞が共通したIGH再構成を有しており、うち9例は両アレルとも共通した再構成（1例は片アレルは再構成なし）であり均一性の高いクローン構造を呈していた。残りの約40％の症例においては大半の細胞に共通した再構成はなく、多くの再構成が検出された。均一性の高いクローン構造を呈していた症例は再発例はなく、複雑なクローン構造を有する症例の方が再発率が高い傾向が見られた。複雑なクローン構造を有する症例はIGH再構成による微小残存病変（MRD）評価も困難であり、KMT2A切断点によるMRD評価が有用であると推測された。
小児B-ALLにおいても多くのIGH再構成を認める症例があるが、それらの多くは、DJ再構成から派生したVDJ再構成、いわゆるrelated cloneが占める。しかし、今回、解析を行った乳児KMT2A転座例においては、配列に共通性がない「独立した」再構成が多くを占めており、クローン進展様式に違いがあることが明らかとなった。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

ddPCRに基づく正確なクローン構造解析により、乳児KMT2A転座陽性ALLに特徴的なクローン進展様式を明らかとした。クローン構造と予後にも相関があることが推測され、クローン構造の正確な理解は、残存腫瘍量の正確な評価のみならず、乳児白血病における難治例の病態解明にも繋がることが期待される。

今後の研究の推進方策

小児および成人KMT2A陽性ALLならびに乳児KMT2A転座陰性例の解析を行うことで、乳児KMT2A転座例のクローン構造に基づく病態解明を進めていきたい。

次年度使用額が生じた理由

コロナ禍等の影響で消耗品の納入時期の遅れもあり、残額が生じた。
年度をまたいで納品予定の発注済み物品もあり、研究期間内に使用予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Two novel high-risk adult B-cell acute lymphoblastic leukemia subtypes with high expression of <i>CDX2</i> and <i>IDH1/2</i> mutations (2022)
  • 著者名/発表者名: Yasuda T, Sanada M, Kawazu M, Kojima S, Tsuzuki S, Sumi M, Sato S, Tange N, Nakamura Y, Katsuoka Y, Sakaida E, Kawamata T, Iida H, Shiraishi Y, Nannya Y, Ogawa S, Taniwaki M, Asou N, Hatta Y, Kiyoi H, Matsumura I, Horibe K, Mano H, Naoe T, Miyazaki Y, Hayakawa F.
  • 雑誌名: Blood 巻: 139 ページ: 1850～1862
  • DOI: 10.1182/blood.2021011921
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] <i>NUDT15</i> variants confer high incidence of second malignancies in children with acute lymphoblastic leukemia (2021)
  • 著者名/発表者名: Yoshida M, Nakabayashi K, Yang W, Sato-Otsubo A, Tsujimoto SI, Ogawa S, Manabe A, Niwa A, Hata K, Yang JJ, Kato M.
  • 雑誌名: Blood Advances 巻: 5 ページ: 5420～5428
  • DOI: 10.1182/bloodadvances.2021005507
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Genetic features of B‐cell lymphoblastic lymphoma with <scp> <i>TCF3‐PBX1</i> </scp> (2021)
  • 著者名/発表者名: Shirai R, Osumi T, Sato-Otsubo A, Nakabayashi K, Mori T, Yoshida M, Yoshida K, Kohri M, Ishihara T, Yasue S, Imamura T, Endo M, Miyamoto S, Ohki K, Sanada M, Kiyokawa N, Ogawa S, Yoshioka T, Hata K, Takagi M, Kato M
  • 雑誌名: Cancer Reports 巻: Sep 23 ページ: e1559
  • DOI: 10.1002/cnr2.1559
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Identification of clonal immunoglobulin λ light-chain gene rearrangements in AL amyloidosis using next-generation sequencing (2021)
  • 著者名/発表者名: Kimura K, Tsukamoto S, Miyazaki K, Kawajiri-Manako C, Ishii A, Rahmutulla B, Fukuyo M, Oshima-Hasegawa N, Mitsukawa S, Takeda Y, Mimura N, Takeuchi M, Ohwada C, Iseki T, Matsusaka K, Sanada M, Yokote K, Kaneda A, Ishida T, Suzuki K, Nakaseko C, Sakaida E.
  • 雑誌名: Experimental Hematology 巻: 101-102 ページ: 34～41.e4
  • DOI: 10.1016/j.exphem.2021.08.001
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Exosomes secreted from cancer-associated fibroblasts elicit anti-pyrimidine drug resistance through modulation of its transporter in malignant lymphoma (2021)
  • 著者名/発表者名: Kunou Shunsuke、Shimada Kazuyuki、Takai Mika、Sakamoto Akihiko、Aoki Tomohiro、Hikita Tomoya、Kagaya Yusuke、Iwamoto Eisuke、Sanada Masashi、Shimada Satoko、Hayakawa Fumihiko、Oneyama Chitose、Kiyoi Hitoshi
  • 雑誌名: Oncogene 巻: 40 ページ: 3989～4003
  • DOI: 10.1038/s41388-021-01829-y
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Clonal evolution and clinical implications of genetic abnormalities in blastic transformation of chronic myeloid leukaemia (2021)
  • 著者名/発表者名: Ochi Y, Yoshida K, Huang YJ, Kuo MC, Nannya Y, Shiraishi Y, Chiba K, Tanaka H, Sanada M, Takaori-Kondo A, Miyano S, Ogawa S, Shih LY.
  • 雑誌名: Nature Communications 巻: 12 ページ: 2833
  • DOI: 10.1038/s41467-021-23097-w
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] Identification of transcriptional features & surface markers of plasma cell clones in POEMS syndrome (2021)
  • 著者名/発表者名: Yusuke Isshiki，Motohiko Oshima，Naoya Mimura， Kensuke Kayamori，Yurie Nagai，Masahide Seki，Yaeko Nakajima， Tomoya Muto，Shokichi Tsukamoto，Yusuke Takeda， Chikako Ohwada，Sonoko Misawa，Junichiro Ikeda，Masashi Sanada， Satoshi Kuwabara，Yutaka Suzuki，Emiko Sakaida，Chiaki Nakaseko， Atsushi Iwama
  • 学会等名: 第83回日本血液学会学術集会
• [学会発表] Intensification of Early-Phase Therapy to Diminish the Prognostic Effect of Myeloid Antigen Expression in Infants with KMT2A-Rearranged Acute Lymphoblastic Leukemia: A Report from the JPLSG MLL-10 Trial. (2021)
  • 著者名/発表者名: Yuki Arakawa, Takashi Ishihara, Takako Miyamura, Takao Deguchi, Masashi Sanada, Toshinori Hori, Tomomi Yamada, MD, Yuki Aoki, Sae Ishimaru, Takayuki Takachi, Mio Yano, Shinya Sasaki, Akiko M Saito, Atsushi Manabe, Keizo Horibe, Toshihiko Imamura, Daisuke Tomizawa.
  • 学会等名: 63rd American Society of Hematology Annual Meeting and Exposition
  • 国際学会
• [学会発表] KMT2A 陽性乳児急性リンパ性白血病におけるフローサイトメトリーでの微小残存病変の検討、JPLSG MLL-10 試験より (2021)
  • 著者名/発表者名: Yuki Arakawa, Takashi Ishihara, Takako Miyamura, Takao Deguchi, Toshinori Hori, Masashi Sanada, Atsushi Manabe, Keizo Horibe
  • 学会等名: 第63回日本小児血液がん学会
• [学会発表] 晩期再発小児B前駆細胞型急性リンパ芽球性白血病のRNAシーケンス解析；JPLSG R-08研究 (2021)
  • 著者名/発表者名: Kentaro Ohki, Satoru Watanabe, Toshihiko Imamura, Masashi Sanada, Hiroaki Goto, Chitose Ogawa, Yasuhide Hayashi, Hidemi Toyoda
  • 学会等名: 第63回日本小児血液がん学会
• [学会発表] 小児ALLにおけるIG/TR再構築の特徴 (2021)
  • 著者名/発表者名: Yuka Iijima, Tomomi Yamada, Toshinori Hori, Takashi Taga, Dai Nishijima, Eisuke Iwamoto, Masashi Sanada
  • 学会等名: 第63回日本小児血液がん学会
• [学会発表] 小児急性リンパ性白血病の再発患者に対するボルテゾミブを含む多剤併用化学療法の第II相試験（医師主導治験） (2021)
  • 著者名/発表者名: Naoyuki Miyagawa, Hiroaki Goto, Atsushi Kikuta, Yoshiyuki Kosaka, Masahiro Sekimizu, Hideki Nakayama, Kenichi Yoshimura, Yuka Iijima, Masashi Sanada, Chitose Ogawa
  • 学会等名: 第63回日本小児血液がん学会
• [学会発表] ターゲットキャプチャシーケンスによる乳児白血病のクロナリティ分析 (2021)
  • 著者名/発表者名: Tomomi Yamada, Yuka Iijima, Takako Miyamura, Toshihiko Imamura, Toshinori Hori, Akiko Saito, Atsushi Manabe, Keizo Horibe, Daisuke Tomizawa, Masashi Sanada
  • 学会等名: 第63回日本小児血液がん学会
• [図書] 小児白血病・リンパ腫―Strategy & Practice「ゲノム医療の現状と展望」 (2021)
  • 著者名/発表者名: 真田昌（分担執筆）
  • 総ページ数: 344
  • 出版者: 中山書店
  • ISBN: 978-4-521-74921-1
• [図書] 臨床血液 「PCR-MRD」 (2021)
  • 著者名/発表者名: 真田昌
  • 総ページ数: 1
  • 出版者: 一般社団法人 日本血液学会