動脈硬化の発症・進展におけるアポA-Vの役割の解析：遺伝子欠損ウサギを用いた研究

2021 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 20K08858
• 研究機関: 山梨大学
• 研究代表者: 新見 学 山梨大学, 大学院総合研究部, 助教 (80644898)
• 研究分担者: 松久 葉一 佐賀大学, 総合分析実験センター, 助教 (20754253) ; チェン ヤジェ 山梨大学, 大学院総合研究部, 特任助教 (90867756) [辞退]
• 研究期間 (年度): 2020-04-01 – 2023-03-31
• キーワード: アポA-V / ノックアウト / ウサギ / CRISPR-Cas9

研究実績の概要

CRISPR-Cas9システムを用いてアポA-Vノックアウトウサギの作出を行った。アポA-Vノックアウトウサギのファウンダー候補は作出できたが、Germ-lineへの組換えが認めらなかった。既存の方法ではCRISPR-Cas9システムのゲノム編集効率自体が低かったため、ガイドRNA等の再検討を行い、ウサギ受精卵における効率的なCRISPR-Cas9システムの構築中である。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

アポA-VノックアウトのGerm-lineへの組換えが認められず、ファウンダーが得られていない。

今後の研究の推進方策

ゲノム編集効率の向上を目指しガイドRNA等の再検討を行い、ウサギ受精卵における効率的なCRISPR-Cas9システムの構築する。

次年度使用額が生じた理由

当該年度に物品費・旅費として使用予定であったが、使用を次年度に繰り越した。

研究成果

• [雑誌論文] Is apoCIII-Lowering A Double-Edged Sword? (2022)
  • 著者名/発表者名: Tang Xiangming、Zhou Huanjin、Yan Haizhao、Niimi Manabu、Fan Jianglin
  • 雑誌名: Journal of Atherosclerosis and Thrombosis 巻: Online ahead of print ページ: -
  • DOI: 10.5551/jat.LE002
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] カイロミクロンレムナントは動脈硬化進展を促進させる：アポE欠損ウサギを用いた研究 (2021)
  • 著者名/発表者名: 新見 学、松久 葉一、周 煥錦、Chen Yajie、Yan Haizhao、北嶋 修司、範 江林
  • 学会等名: 第53回日本動脈硬化学会 総会・学術集会
• [学会発表] マトリックスメタロプロテイナーゼと動脈硬化性疾患： ウサギモデルからの知見 (2021)
  • 著者名/発表者名: 新見 学、Chen Yajie、範 江林
  • 学会等名: 第53回日本動脈硬化学会 総会・学術集会
• [学会発表] Apolipoprotein CIII deficiency inhibits cholesterol diet-induced hyperlipidemia and atherosclerosis in knockout rabbits (2021)
  • 著者名/発表者名: Haizhao Yan, Manabu Niimi, Fumikazu Matsuhisa, Xiawen Yang, Huanjin Zhou, Shuji Kitajima, Yajie Chen, Chuan Wang, Jian Yao, Dongshan Yang, Jifeng Zhang, Masami Murakami, Katsuyuki Nakajima, Yao Wang, Enqi Liu, Jingyan Liang, Liangxue Lai, Y. Eugene Chen, Jianglin Fan
  • 学会等名: The 19th International Symposium on Atherosclerosis
  • 国際学会
• [図書] Atherosclerosis Methods and Protocols, Chapter 25: Use of Rabbit Models to Study Atherosclerosis (2022)
  • 著者名/発表者名: Jianglin Fan, Manabu Niimi, Yajie Chen, Ritsuko Suzuki, Enqi Liu
  • 総ページ数: 413-431
  • 出版者: Springer
  • ISBN: 978-1-0716-1923-0