HPA軸における循環血液中microRNAの生理的・病理的意義の解明

2020 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 20K08907
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 山本 雅昭 神戸大学, 医学部附属病院, 特定助教 (30724017)
• 研究期間 (年度): 2020-04-01 – 2023-03-31
• キーワード: 神経内分泌学 / ストレス / 副腎不全 / エクソソーム

研究実績の概要

ストレス応答はHPA軸がその中枢を担う、生体の恒常性の維持に極めて重要な機構であり、ストレス刺激によりHPA軸が賦活化され最終的に副腎よりコルチゾール分泌が誘導される。その軸のいずれかの部位に生じた障害によりコルチゾール分泌不全は生じ、結果としての副腎不全をきたす。現在、副腎不全の診断法としてホルモンの基礎値のみならずインスリン低血糖試験や迅速ACTH試験など様々な刺激試験を組み合わせて行っている。しかし各種検査の実施にはリスクが伴い、結果の解釈には経験を必要とする上にそれら検査結果が病態を正確に反映していない場合も多く、不適切な補充療法がなされるケースも散見されることから、病態を正確に反映する簡便なマーカーが必要とされてきた。今回代表者がマウスから見出した血中microRNAを副腎不全の新規マーカーとして期待されるものであり、当科の患者検体を用いて検討を行い診断マーカーとしての確立を目指すこと、そして新たな生理活性物質としての側面からストレス応答において果たす生理的役割を明らかにすることが本研究の目的である。
以前の検討で見出したストレス下において誘導されるマウス血中miRNAの分泌がどの臓器で検出可能か、まずマウス由来corticotroph由来細胞株とマウス下垂体初代培養細胞に対してデキサメタゾン処理した時のmiRNA発現増加をRT-PCR法で検討したが、下垂体では有意な増加反応は認めなかったことから、血中miRNAのソースとしては否定的と考えた。その他の実験系としてヒトACTH単独欠損症のハイドロコートン補充前後の血清を用いてメタボローム解析を行い、ステロイド補充に関連して複数種の血中代謝産物の変化を認め、現在再現性とその意義を検討する予定である。今後実際の副腎不全モデルマウスおよびACTH単独欠損症患者に対して補充前後における血中エクソソームを抽出し、miRNA-seqを用いてバイオマーカー探索やパスウェイ解析を行う予定である。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

当科にて凍結保存していたヒト副腎不全症の血液からエクソソーム抽出を行いmiRNAの網羅的解析を行う予定であったが、サンプルが経年変化のため検討可能な量の抽出ができなかった。現在、患者検体を再収集し再解析を行う予定であるが、新型コロナによる影響で患者の入院予定に大幅な遅れが出ている。また同様にエクソソーム抽出に必須である学内の共同研究室にある超遠心分離機が故障のため修理に時間を要している状況である。解析可能になればすぐに再開する予定である。

今後の研究の推進方策

エクソソーム抽出が再度可能な状況になれば、まずマウスおよびヒト副腎不全モデルより得られた血液サンプルからエクソソームを抽出し、網羅的解析を行い、標的となる分子を同定する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Two Cases of anti?PIT-1 Hypophysitis Exhibited as a Form of Paraneoplastic Syndrome not Associated With Thymoma (2021)
  • 著者名/発表者名: Kanie Keitaro、Iguchi Genzo、Inuzuka Megumi、Sakaki Kentaro、Bando Hironori、Urai Shin、Shichi Hiroki、Fujita Yasunori、Matsumoto Ryusaku、Suda Kentaro、Yamamoto Masaaki、Fukuoka Hidenori、Taniguchi Takao、Ogawa Wataru、Takahashi Yutaka
  • 雑誌名: Journal of the Endocrine Society 巻: 5 ページ: bvaa194
  • DOI: 10.1210/jendso/bvaa194
  • 査読あり
• [雑誌論文] DNA damage and growth hormone hypersecretion in pituitary somatotroph adenomas (2020)
  • 著者名/発表者名: Ben-Shlomo Anat、Deng Nan、Ding Evelyn、Yamamoto Masaaki、Mamelak Adam、Chesnokova Vera、Labadzhyan Artak、Melmed Shlomo
  • 雑誌名: Journal of Clinical Investigation 巻: 130 ページ: 5738～5755
  • DOI: 10.1172/JCI138540
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Mechanisms Underlying Autonomous Adrenocorticotropic Hormone Secretion in Cushing’s Disease (2020)
  • 著者名/発表者名: Fukuoka Hidenori、Shichi Hiroki、Yamamoto Masaaki、Takahashi Yutaka
  • 雑誌名: International Journal of Molecular Sciences 巻: 21 ページ: 9132～9132
  • DOI: 10.3390/ijms21239132
  • 査読あり
• [雑誌論文] The impact of adrenal tumor multidisciplinary team meetings on clinical outcomes (2020)
  • 著者名/発表者名: Fukuoka Hidenori、Shigemura Katsumi、Kanzawa Maki、Kanda Tomonori、Yamamoto Masaaki、Kitagawa Koichi、Sakamoto Mariko、Iguchi Genzo、Ogawa Wataru、Fujisawa Masato、Takahashi Yutaka
  • 雑誌名: Endocrine 巻: 69 ページ: 519～525
  • DOI: 10.1007/s12020-020-02361-x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Autoimmune Pituitary Disease: New Concepts With Clinical Implications (2020)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto Masaaki、Iguchi Genzo、Bando Hironori、Kanie Keitaro、Hidaka-Takeno Ryoko、Fukuoka Hidenori、Takahashi Yutaka
  • 雑誌名: Endocrine Reviews 巻: 41 ページ: 261～272
  • DOI: 10.1210/endrev/bnz003
  • 査読あり
• [雑誌論文] Colorectal Neoplasm in Acromegaly: Epidemiology and Underlying Mechanisms (2020)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto Masaaki、Takahashi Yutaka
  • 雑誌名: Intech open 巻: online ページ: online
  • DOI: 10.5772/intechopen.91336
• [学会発表] Effects of the rate of impaired insulin secretion on bone mineral density in type 1 diabetes (2021)
  • 著者名/発表者名: Masaki Suzuki, Shin Urai, Hidenori Fukuoka, Yushi Hirota, Masaaki Yamamoto, Naoki Yamamoto, Hiroki Shichi, Yasunori Fujita, Keitaro Kanie, Genzo Iguchi, Yutaka Takahashi, Wataru Ogawa
  • 学会等名: the Annual Meeting of the Endocrine Society, ENDO 2021
  • 国際学会
• [学会発表] A case of adrenocortical carcinoma with severe hypertension and hypokalemia (2021)
  • 著者名/発表者名: Naoki Yamamoto, Masaaki Yamamoto, Hayato Fukumitsu, Maki Kanzawa, Hidenori Fukuoka, Wataru Ogawa
  • 学会等名: the Annual Meeting of the Endocrine Society, ENDO 2021
  • 国際学会
• [学会発表] Two Cases of anti-PIT-1 Hypophysitis Exhibited as a Form of Paraneoplastic Syndrome not Associated with Thymoma (2021)
  • 著者名/発表者名: Keitaro Kanie, Genzo Iguchi, Megumi Inuzuka, Hironori Bando, Naoki Yamamoto, Masaki Suzuki, Shin Urai, Hiroki Shichi, Masaaki Yamamoto, Hidenori Fukuoka, Yasunori Fujita, Wataru Ogawa, Yutaka Takahashi
  • 学会等名: the Annual Meeting of the Endocrine Society, ENDO 2021
  • 国際学会
• [図書] 日本医師会雑誌 【免疫・炎症疾患のすべて】免疫・炎症疾患各論/内分泌疾患 下垂体炎、多腺性自己免疫症候群(APS) (2020)
  • 著者名/発表者名: 山本 雅昭, 高橋 裕
  • 総ページ数: 3
  • 出版者: 日本医師会