| 研究課題/領域番号 |
20K08937
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| 研究機関 | 京都府立医科大学 |
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研究代表者 |
田中 智子 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 客員講師 (20822414)
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| 研究分担者 |
東 真弓 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (10380453)
文野 誠久 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40405254)
田尻 達郎 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (80304806)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 神経芽腫 / MEK阻害剤 / MAPK経路 / Hippo経路 |
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| 研究実績の概要 |
実験計画時には、トラメチニブとの併用薬の候補としてCDK阻害剤を想定していたが、他施設からトラメチニブ投与によるYAPの発現および活性化が神経芽腫にお けるトラメチニブ耐性獲得に強く影響しているとの報告があったことから、CDK阻害剤とともにYAP阻害剤に着目することとした。
in vitroでYAP阻害剤(X)の単剤での使用効果を確認したところ、NRAS変異神経芽腫細胞株であるSK-N-ASに対して一定の増殖抑制効果を認めた。また、トラチニブでは確認されなかったアポトーシスも 惹起されることが明らかとなった。続いてin vitroで、YAP阻害剤(X)とトラメチニブの短期間の併用効果を確認したところ、強い相乗効果が確認できた。
そこで、SK-N-ASを用いてxenograftマウスを作成し、腫瘍生着後にvehicleのみ、トラメチニブ単剤、YAP阻害剤(X)単剤、トラメチニブ/YAP阻害剤(X)併用、 トラメチニブ6週投与後のYAP阻害剤(X)追加の5群に分けて腫瘍サイズおよび生存曲線を追跡した。併用群で有意な抗腫瘍効果が確認されたことに加え、併用期間については、治療開始時期から併用しても、トラメチニブ耐性が獲得されつつあるトラメチニブ投与6週後から併用しても効果に差がないことも確認された。 一方、こうした有意な併用効果をもってしても、最終的には腫瘍が再増大することも確認された。
現在，トラメチニブとYAP阻害剤(X)の相乗効果が確認できたことから、より適正な投与量の組み合わせについて検討中であり，その後に神経芽腫術後局所微小残存病変を模したL-MRDモデルによるトラメチニブ単剤とトラメチニブ/YAP阻害剤(X)の併用効果について進む予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
当初、トラメチニブとの併用薬としてはCDK阻害剤を想定していたが、他施設からトラメチニブ投与によるYAPの発現および活性化が神経芽腫におけるトラメチニ ブ耐性獲得に強く影響しているとの報告があったことから、YAP阻害剤に着目することとした。まずin vitroでYAP阻害剤(X)の単剤での使用効果を確認したと ころ、NRAS変異神経芽腫細胞株であるSK-N-ASに対して単剤でも一定の増殖抑制効果を認めた。また、CA3で治療した細胞株を使用してフローサイトメトリーを行 うと、トラメチニブでは確認されなかったアポトーシスも惹起されることが明らかとなった。続いてin vitroで、YAP阻害剤(X)とトラメチニブの短期間の併用 効果を確認したところ、強い相乗効果を有することが確認できた。そこで、SK-N-ASを用いたxenograftマウスにて，抗腫瘍効果を確認した．
現在ここまでの段階での論文化を先行することとし，2021年9月にpublishされた．その後適正な併用量の組み合わせについて検討を行っているが，マウスの腫瘍生着率が低く，予定よりやや遅れて進行している．
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| 今後の研究の推進方策 |
より適正な投与量の組み合わせについて検討中であり，その後に神経芽腫術後局所微小残存病変を模したL-MRDモデルによるトラメチニブ単剤とトラメチニブ/YAP阻害剤(X)の併用効果について進み、次期後療法モデルプロトコルの策定につなげていく．
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| 次年度使用額が生じた理由 |
今年度はマウスの腫瘍生着率が低く，予定より使用マウスや定量検査が使用量が少なったため，決算額が予算より少なくなった．その後研究結果の安定が得られてきたため，次年度において今年度使用するはずであったマウス購入費および飼育費，pERKやYAPなどについてウェスタンブロットやPCRを行うための試薬の購入費を使用する予定である．
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