| 研究課題/領域番号 |
20K09053
|
|---|
| 研究機関 | 信州大学 |
|---|
研究代表者 |
春宮 覚 信州大学, 医学部, 特任准教授 (50301792)
|
|---|
| 研究分担者 |
中山 淳 信州大学, 学術研究院医学系, 教授 (10221459)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2024-03-31
|
| キーワード | 胃癌 / 糖鎖 / 遺伝子改変マウス / 糖転移酵素 |
|---|
| 研究実績の概要 |
本研究の目的はα1,4結合型N-アセチルグルコサミン(αGlcNAc)を欠損したA4gntノックアウト(KO)マウスの胃癌発症機構を明らかにすることである。
IL-11発癌シグナルのαGlcNAcによる抑制という観点から、そのメカニズムを明らかにするため研究を進めた。令和4年度はこれまでに同定されたαGlcNAc結合蛋白質と発癌シグナル、とくにSTAT3の活性化との関連を調べた。
以前、我々はGSA-IIレクチンビーズ結合画分の質量分析によりTFF2、MUC6、MUC5AC、gastrokine-2、galectin-2、MUC1を同定した（16K15255 科研費 研究成果報告書、Cancer Science,113:3852-3863, 2022）。GSA-IIレクチンビーズ結合画分にはその他にIL-11シグナル伝達に関係する蛋白質としてgp130が同定された。gp130は野生型マウス胃粘膜溶解液のGSA-IIレクチンビーズ結合画分に存在し、A4gnt KOマウス胃粘膜溶解液からの結合画分には検出されなかった。このことからgp130へのαGlcNAcの結合が示唆された。gp130の胃粘膜における発現の経時的変化は10週齢のA4gnt KOマウスで野生型マウスと比較してとくに亢進していた。これはSTAT3活性化の経時的変化と一致していた。現在、gp130糖鎖へのαGlcNAcの結合に関して解析を進めている。Cos7細胞を用いたgp130とα1,4-N-アセチルグルコサミン転移酵素（α4GnT）の共発現系ではgp130へのαGlcNAcの結合が確認されている。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
IL-11～STAT3経路に関連する糖タンパク質の内、gp130へのαGlcNAcの結合が示唆された。gp130の胃粘膜における発現の経時的変化は10週齢のA4gnt KOマウスで最も亢進しており、これはSTAT3活性化の経時的変化と一致していた。αGlcNAc認識レクチンであるTFF2に関してIL-11～STAT3活性化経路への関与についても研究を進めた。TFF2とIL-11受容体、TFF2とgp130の相互作用実験における免疫沈降-イムノブロット分析、Blue Native PAGEの実験系の確立に時間を要し、進展が遅れた。
|
| 今後の研究の推進方策 |
ヒト胃癌細胞株AGS細胞を使用したTet-onシステムでα4GnTを発現させた細胞と発現していない細胞に対してIL-11刺激後、それらのSTAT3活性を比較する。α4GnTを発現した場合にはSTAT3の活性は減弱すると考えられる。
マウス胃粘膜で同定されたαGlcNAc結合タンパク質に関して細胞においても同様にαGlcNAcが結合しているかを確認する。
IL-11シグナル抑制におけるTFF2の関与について明らかにするために、IL-11～STAT3経路におけるαGlcNAc結合タンパク質とTFF2との相互作用について検討する。
|
