Neoantigenを標的としたテーラーメードiPS-DCがんワクチン療法の開発

2020 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 20K09063
• 研究機関: 和歌山県立医科大学
• 研究代表者: 尾島 敏康 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (60448785)
• 研究分担者: 山上 裕機 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (20191190) ; 北谷 純也 和歌山県立医科大学, 医学部, 学内助教 (30596979) ; 中村 公紀 和歌山県立医科大学, 医学部, 准教授 (80364090)
• 研究期間 (年度): 2020-04-01 – 2023-03-31
• キーワード: iPS細胞 / 樹状細胞 / がんワクチン / Neoantigen

研究実績の概要

今年度はB16マウスを用いた動物実験を行った。具体的にはB16メラノーマ細胞のtotal mRNAを抽出し，Ｃ57ＢＬマウス由来iPS細胞より分化誘導した樹状細胞(DC)に遺伝子導入した。このiPS-DCがメラノーマに対して，特異的な細胞傷害性Tリンパ球が誘導可能か否かを検討した。具体的な研究内容は以下である。B16を拡大培養し，TRIzol RNA Isolation Reagent（Invitrogen）を用いて，total RNAを分離．さらに，Dynabeads mRNA Purification Kit（Life technologies）を用いて，total RNAからmRNAを精製した。iPS-DC分化誘導はこれまでの4step法を用いた．分化誘導したiPS-DC，およびナイーブなBMDCに，B16 mRNA transfectionを行った．mRNAの導入効率については，B16のTAAであるgp100をFACSで解析することで比較検討を行い至適mRNA量は50μlであった．続いてマウスワクチン研究を行った。iPS-DC-tumor mRNA，BMDC-tumor mRNAの作成を行った後に，各DC (各群n=10) をマウス背部皮下に接種し14日後にマウス脾臓を採取した．脾臓よりCD8+リンパ球を採取し，B16 cell lineと供培養することでCTLを誘導．CTLの細胞傷害活性をB16 を用いた51Cr-release assayにて測定した．現在マウスの背部皮下にB16を接種し，5日後に，大腿部皮下にiPS-DC-mRNA群，BM-DC-mRNA群にわけて接種し (各群n=10)． mouse皮下腫瘍体積を経時的に計測し，そのin vivoワクチン効果の比較検討を行っている．現時点で作業仮説どおりiPS-DC-mRNAワクチンはナイーブなBMDC-mRNAとのワクチン効果は変わらない結果を得ている。

現在までの達成度 (区分)

1: 当初の計画以上に進展している

理由

2020年度はマウス研究を主におこなったが，すべての研究パートで作業仮説どおりの結果が得られた。2021年度は予定通りhumanの腫瘍細胞より検索したneoantigenをtargetとした研究が開始となる。

今後の研究の推進方策

現在行っているマウスのワクチン実験が終了したら予定通りhuman腫瘍細胞を用いた本丸の実験が開始となる。当大学病院で治療を行う消化器固形癌患者を対象に，研究者から本研究内容を説明し，研究参加の同意を得ている．手術症例を対象とし，術中に切除された組織から大腸癌組織を採取し、その組織を酵素処理し，CTOS法を用いた3次元培養を行うことで癌組織のcell line化を行っている．すでに研究はスタートしており，大腸癌患者よりCTOS法を用いた腫瘍のcell line化に成功している．引き続き効率よく研究を推進していく予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Oncolytic virotherapy with SOCS3 enhances viral replicative potency and oncolysis for gastric cancer. (2021)
  • 著者名/発表者名: Matsumura S, Nakamori M, Tsuji T, Kato T, Nakamura M, Ojima T, Fukuhara H, Ino Y, Todo T, Yamaue H.
  • 雑誌名: Oncotarget. 巻: 12 ページ: 344-354.
  • DOI: 10.18632/oncotarget.27873. eCollection 2021 Feb 16.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Safety and feasibility of laparoscopic gastrectomy for remnant gastric cancer compared with open gastrectomy: Single-center experience. (2021)
  • 著者名/発表者名: Kitadani J, Ojima T, Nakamura M, Hayata K, Katsuda M, Takeuchi A, Tominaga S, Fukuda N, Motobayashi H, Nakai T, Yamaue H.
  • 雑誌名: Medicine (Baltimore). 巻: 100 ページ: e23932.
  • DOI: 10.1097/MD.0000000000023932.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Single-incision laparoscopic antrectomy for type I gastric neuroendocrine tumor: a case report. (2021)
  • 著者名/発表者名: Kitadani J, Ojima T, Hayata K, Katsuda M, Tominaga S, Fukuda N, Motobayashi H, Nagano S, Nakamura M, Yamaue H.
  • 雑誌名: Surg Case Rep. 巻: 7 ページ: 15
  • DOI: 10.1186/s40792-021-01109-7.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Phase 1 Study of Combined Chemotherapy of Nab-Paclitaxel, S-1, and Oxaliplatin for Gastric Cancer with Peritoneal Metastasis (NSOX Study). (2021)
  • 著者名/発表者名: Nakamura M, Ojima T, Katsuda M, Hayata K, Kitadani J, Nakamori M, Yamaue H.
  • 雑誌名: Oncology. 巻: 99 ページ: 57-61.
  • DOI: 10.1159/000509396.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Robotic Double Tract Reconstruction After Proximal Gastrectomy for Gastric Cancer. (2021)
  • 著者名/発表者名: Ojima T, Nakamura M, Hayata K, Yamaue H.
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol. 巻: 28 ページ: 1445-1446.
  • DOI: 10.1245/s10434-020-09015-2.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Full robotic Roux-en-Y reconstruction after gastrectomy for gastric cancer: a loop reconstruction technique. (2020)
  • 著者名/発表者名: Ojima T, Nakamura M, Yamaue H.
  • 雑誌名: Updates Surg. 巻: 72 ページ: 1279-1281.
  • DOI: 10.1007/s13304-020-00889-1.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Robotic D2 total gastrectomy with en-mass removal of the spleen and body and tail of the pancreas for locally advanced gastric cancer. (2020)
  • 著者名/発表者名: Ojima T, Nakamura M, Hayata K, Yamaue H.
  • 雑誌名: Surg Oncol. 巻: 35 ページ: 22-23.
  • DOI: 10.1016/j.suronc.2020.07.007.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Endoscopic submucosal tunnel dissection versus conventional endoscopic submucosal dissection for early gastric cancers: outcomes of 799 consecutive cases in a single institution. (2020)
  • 著者名/発表者名: Ojima T, Takifuji K, Nakamura M, Nakamori M, Hayata K, Kitadani J, Yamaue H.
  • 雑誌名: Surg Endosc. 巻: 34 ページ: 5625-5631.
  • DOI: 10.1007/s00464-020-07849-1.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Postoperative atrial fibrillation does not impact on overall survival after esophagectomy in patients with thoracic esophageal cancer: results from a randomized, double-blind, placebo-controlled trial. (2020)
  • 著者名/発表者名: Ojima T, Nakamura M, Hayata K, Kitadani J, Katsuda M, Nakamori M, Takeuchi A, Maruoka S, Fukuda N, Tominaga S, Motobayashi H, Yamaue H.
  • 雑誌名: Oncotarget. 巻: 11 ページ: 2414-2423.
  • DOI: 10.18632/oncotarget.27643.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Laparoscopic Limited Resection for Duodenal Gastrointestinal Stromal Tumors. (2020)
  • 著者名/発表者名: Ojima T, Nakamura M, Hayata K, Kitadani J, Katsuda M, Takeuchi A, Tominaga S, Yamaue H.
  • 雑誌名: J Gastrointest Surg. 巻: 24 ページ: 2404-2408.
  • DOI: 10.1007/s11605-020-04692-6.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Anticancer effects of chemokine-directed antigen delivery to a cross-presenting dendritic cell subset with immune checkpoint blockade. (2020)
  • 著者名/発表者名: Mizumoto Y, Hemmi H, Katsuda M, Miyazawa M, Kitahata Y, Miyamoto A, Nakamori M, Ojima T, Matsuda K, Nakamura M, Hayata K, Fukuda-Ohta Y, Sugiyama M, Ohta T, Orimo T, Okura S, Sasaki I, Tamada K, Yamaue H, Kaisho T.
  • 雑誌名: Br J Cancer. 巻: 122 ページ: 1185-1193.
  • DOI: 10.1038/s41416-020-0757-2.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Laparoscopic Roux-en-Y reconstruction using conventional linear stapler in robotic total gastrectomy for gastric cancer. (2020)
  • 著者名/発表者名: Ojima T, Nakamura M, Hayata K, Yamaue H.
  • 雑誌名: Surg Oncol. 巻: 33 ページ: 9-10.
  • DOI: 10.1016/j.suronc.2019.12.003.
  • 査読あり
• [学会発表] iPS細胞由来樹状細胞を用いた癌ワクチン療法 (2021)
  • 著者名/発表者名: 尾島敏康 岩本博光 北谷純也 丸岡慎平 冨永信太 山上裕機
  • 学会等名: 第20回日本再生医療学会総会
  • 招待講演