| 研究課題/領域番号 |
20K09348
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| 研究機関 | 広島大学 |
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研究代表者 |
岡崎 貴仁 広島大学, 医系科学研究科(医), 専門研究員 (60437613)
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| 研究分担者 |
弓削 類 広島大学, 医系科学研究科(保), 教授 (20263676)
栗栖 薫 広島大学, 医系科学研究科(医), 名誉教授 (70201473)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 間葉系幹細胞 / 脳梗塞急性期 / 模擬微小重力環境 / ヒト頭蓋骨 / ラット |
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| 研究実績の概要 |
動物実験用の麻酔器、顕微鏡、手術器具を用いて、脳梗塞モデルラットを安定して作成する方法を確立した。ヒト頭蓋骨由来の間葉系幹細胞は、手術中に生じた側頭骨もしくは蝶形骨からの骨片から安定して樹立することに成功した。さらにhcMSCsを安定して樹立・培養・継代を行い、クリノスタット(微小重力環境細胞培養装置)を用いて、MG環境下と１G環境下で培養したhcMSCsを安定して樹立することができた。脳梗塞モデルラットへのMSCs投与を安定して施行することに成功した。具体的には、脳梗塞急性期（脳梗塞完成後12時間後）に、尾静脈から経静脈的に行った。投与細胞は1.0×1000000個を100μlで希釈した。PBS群、1G(1G環境下でhcMSCを培養)群、MG(MG環境下でhcMSCを培養)群の3群にわけて、移植後それぞれの運動機能を含めたmodified neurological severity score (mNSS)の評価を行ったところ、MG群は1G群と比較して有意に運動機能が回復した（最終的にPBS群:N=9、1G群：N=9、MG群：N=10で検討した）。梗塞巣の体積変化に関しては、3群において明らかな有意差は認めなかった。脳梗塞周辺組織における免疫組織学的検討では、MSCs投与後 Day 35における脳梗塞巣での① Synaptophysinと② Tuj1について免疫染色を行ったが、各群とも、脳梗塞巣（ischemic border zone ）に、SYP、Tuj 1 が確認された。PBS群に比べ、1G群およびMG群で比較的高いSYP、Tuj1を認め、またMG群はSYP、Tuj1いずれも全体的な染色強度が強いという結果が得られた。
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