| 研究課題/領域番号 |
20K09372
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| 研究機関 | 高知大学 |
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研究代表者 |
上羽 哲也 高知大学, 教育研究部医療学系臨床医学部門, 教授 (00314203)
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| 研究分担者 |
八幡 俊男 高知大学, 教育研究部医療学系臨床医学部門, 助教 (40380323)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 膠芽腫 / X染色体不活化 / がん抑制遺伝子 |
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| 研究実績の概要 |
原発性脳腫瘍の膠芽腫では、予後や治療感受性に性差が存在し、X染色体上に存在する遺伝子が病態に影響していることがゲノム解析により示唆されている。膠芽腫細胞における生理的かつ直接的な不活化X染色体上に存在する膠芽腫関連遺伝子の探索と機能解析を実施するために、両性の膠芽腫患者からスフェロイド培養により初代培養細胞を分離培養した。これらの培養細胞とそれらの由来となる腫瘍組織において神経膠腫で頻繁に異常を示す遺伝子をMLPA法とサンガーシークエンシングにより解析し、TERTプロモーターやINK4Aの遺伝子座に異常があり、IDH変異や1p19qの共欠失は陰性であることを確認した。女性患者由来の膠芽腫細胞において不活化X染色体を脱落した細胞を選択するために、ベクター挿入部位近傍の遺伝子発現に影響を与えにくいX染色体のターゲティングベクターを構築した。また、重症免疫不全マウスを用いて、これらの細胞の造腫瘍性についても検討を進め、腫瘍形成能を保持する細胞を同定した。現在、ゲノム編集技術を用いて不活化X染色体を脱落した細胞の樹立を進めている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
重症免疫不全マウスにおいて腫瘍形成する細胞の選出に時間を費やした。ルシフェラーゼ遺伝子とRFP遺伝子をレンチウイルスベクターで細胞に導入することで造腫瘍性の検討の効率化をおこなっている。
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| 今後の研究の推進方策 |
女性の膠芽腫患者に由来する細胞からX染色体を脱落した細胞を樹立し、トランスクリプトーム解析をおこない、不活化X染色体から発現する遺伝子を同定する。siRNAやゲノム編集を用いた標的遺伝子の不活化によりがん形質の変化についても検討することでそれらの遺伝子の機能と新たな腫瘍抑制経路を明らかにする。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
研究の遅れによるもの
本年度においてトランスクリプトーム解析等の網羅的な解析に使用する
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