| 研究課題/領域番号 |
20K09774
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| 研究機関 | 熊本大学 |
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研究代表者 |
瀧原 祐史 熊本大学, 病院, 助教 (50640140)
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| 研究分担者 |
井上 俊洋 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 教授 (00317025)
高橋 枝里 熊本大学, 病院, 講師 (60622602)
水野 秀信 熊本大学, 国際先端医学研究機構, 特任准教授 (00567159)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 緑内障 / 生細胞イメージング / 生体イメージング / ミトコンドリア |
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| 研究実績の概要 |
緑内障は主に眼圧ストレスによる視神経乳頭での網膜神経節細胞の軸索絞扼で始まり、最終的にその細胞死が生じる疾患である。現在の緑内障検査は網膜神経節細胞の細胞死後変化の評価であり、軸索絞扼の段階での、生存している網膜神経節細胞の機能障害のリアルタイムな検出法確立は重要課題である。本研究の目的は、生細胞イメージング、生体イメージングを用いて、網膜神経節細胞などの障害を早期に検出できる基礎的な系を確立することである。Ｉｎ ｖｉｔｒｏにおいて、ｔｗｏ－ｓｔｅｐ ｉｍｍｕｎｏｐａｎｎｉｎｇ法による単離後の網膜神経節細胞、あるいはｃｏｍｍｅｒｃｉａｌｌｙ ａｖａｉｌａｂｌｅなヒト線維柱帯細胞を用いて、３７℃、５％ＣＯ２の環境下での生細胞イメージングの系を確立した。タイムラプス撮影により、長期間の細胞動態の評価が可能となった。加えてこの生細胞イメージングの系で用いることができるストレスモデルの条件を検討し、ミトコンドリア障害を生じる条件をみいだしつつある。Ｉｎ ｖｉｖｏにおいて、網膜神経節細胞を特異的に標識できる遺伝子改変マウスに対して、二光子励起顕微鏡を用いて、網膜神経節細胞の生体イメージングを行った。今後、これらの系により、網膜神経節細胞、線維柱帯細胞の障害を早期に検出できるイメージングの評価方法確立を進める。本研究での成果は超高齢社会の日本で増加している、緑内障の病態解明、診断・治療法創出への展開が期待される。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
網膜神経節細胞、線維柱帯細胞の生細胞イメージングの系を検討できている。タイムラプス撮影により、長期間の細胞動態の評価が可能となった。この生細胞イメージングの系で用いることができるストレスモデルの条件を検討し、ミトコンドリア障害を生じる条件をみいだしつつある。加えて、網膜神経節細胞を特異的に標識できる遺伝子改変マウスに対して、二光子励起顕微鏡を用いて、網膜神経節細胞の生体イメージングによる検討を進めている。
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| 今後の研究の推進方策 |
網膜神経節細胞、線維柱帯細胞の生細胞イメージングを用いたストレスモデルでの検討を進める。さらに二光子励起顕微鏡を用いた網膜神経節細胞の生体イメージングも駆使して、網膜神経節細胞、線維柱帯細胞の障害を早期に検出できるイメージングの評価方法確立を目指す。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
生細胞イメージング、生体イメージングにより、網膜神経節細胞、線維柱帯細胞の障害を早期に検出できるイメージングの評価方法確立を目指すため。
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