| 研究課題/領域番号 |
20K09811
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| 研究機関 | 東京歯科大学 |
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研究代表者 |
島崎 潤 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (40170930)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 羊膜 / 間葉系幹細胞 / エクソソーム |
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| 研究実績の概要 |
羊膜は創傷治癒促進効果や抗炎症作用があるだけでなく血管のない免疫寛容組織として欠損組織の代替えに移植されるなど、数多く臨床の場で使用されてきた。しかし、その効果や作用のメカニズムについて不明な点が多い。我々はこれまでに羊膜から分離した間葉系細胞を骨芽細胞や神経細胞へ分化誘導させることに成功し、その間葉系細胞の培養上清が角膜上皮の創傷治癒を促進することを報告してきた。これらのことから、間葉系細胞から放出される因子(セクレトーム)は角膜上皮の創傷治癒を促進することが推察される。本研究では、羊膜から分離した間葉系細胞を用いて、角膜上皮創傷治癒を促進するセクレトーム、特に再生医療でも注目されている細胞外小胞体（エクソソーム）を分離し、角膜上皮創傷治癒モデルならびにドライアイモデルを作成し、その効果とメカニズムを明らかにすることを目的としている。本年度においては羊膜由来間葉系細胞からエクソソームの分離を検討してきた。羊膜由来間葉系細胞から分離したエクソソームはCD63の発現はまだ確認できていないものの、CD9ならびにTSG101の発現をWestern blotで確認することができた。今後はさらに羊膜由来間葉系細胞からのエクソソームの解析を行うとともに、培養上皮シートを用いた相性治癒モデルやウサギに相性治癒モデルを作成し、エクソソーム添加による効果の観察を行う予定である。また、ドライアイへの効果を観察するため、ウサギドライアイモデルを作成する。AMF由来エクソソームを点眼し、炎症細胞、血管新生、角膜混濁、上皮化等に対する影響を観察する予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
羊膜由来間葉系細胞の培養上清からエクソソームの分離を行って、分離されたのがエクソソームであることが分かってきた。分離は概ね順調に行えていると考えられる。分離したエクソソームの解析は2021年度においても行う予定であり、エクソソームであることを確認しながら、次のステップへ進めると考えられる。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後はさらに羊膜由来間葉系細胞からのエクソソームの解析を行うとともに、培養上皮シートを用いた相性治癒モデルやウサギに相性治癒モデルを作成し、エクソソーム添加による効果の観察を行う予定である。また、ドライアイへの効果を観察するため、ウサギドライアイモデルを作成する。AMF由来エクソソームを点眼し、炎症細胞、血管新生、角膜混濁、上皮化等に対する影響を観察し、その効果を明らかにする。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
試薬の購入においてキャンペーン等効率よく使用して購入することができたため、予定よりも使用額が少なくなりました。2021年度においても効率よく研究費の使用を行うって、培地等の試薬の購入を増やす予定である。
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