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2021 年度 実施状況報告書

幹細胞培養上清の浄化濃縮法の開発と再生医療への応用

研究課題

研究課題/領域番号 20K09850
研究機関自治医科大学

研究代表者

呉 雲燕  自治医科大学, 医学部, ポスト・ドクター (40636586)

研究分担者 吉村 浩太郎  自治医科大学, 医学部, 教授 (60210762)
研究期間 (年度) 2020-04-01 – 2023-03-31
キーワード脂肪由来間質幹細胞 / 培養上清 / 幹細胞培養上清 / 浄化濃縮幹細胞培養上清 / ASC
研究実績の概要

本研究では、ヒト脂肪間質幹細胞(human adipose-derived stromal/stem cells, hASC)由来培養上清を用いて、「浄化濃縮工程」を通して、浄化濃縮培養上清による新たな再生治療法の確立を目的とする。
上記目的を達成するため、① 高機能培養上清を回収するための最適なASC培養方法を確立する。② ①の方法で回収した培養上清を「浄化・濃縮工程」を通じて、有害物質除去かつ有用因子濃縮された「浄化濃縮幹細胞培養上清」を作製する。③ 体外実験にて浄化濃縮幹細胞培養上清の有効性を確認する。④ 疾患動物モデルを用いて、浄化濃縮培養上清による創傷治癒への有効性と安全性を評価することにより臨床研究用の治療プロトコールを確立する。
今年度は、限外濾過法を用いて幹細胞培養上清の「濃縮」及び「浄化」を実現することができた。また、限外濾過工程に使われる限外ろ過膜の公称分化分子量(norminal molecular weight limit,NMWL)について検討し、浄化濃縮幹細胞培養上清作製に於ける最適なNMWLを確定した。さらに、幹細胞培養上清、浄化濃縮幹細胞培養上清及び濃縮後廃液における有用因子、有害成分の定量解析を行い、体外実験にて浄化濃縮幹細胞培養上清の機能解析も行った。

現在までの達成度
現在までの達成度

2: おおむね順調に進展している

理由

今年度は、浄化濃縮幹細胞培養上清の作製法の確立が成功した。さらに、体外実験にて浄化濃縮幹細胞培養上清の機能解析も行ったため、概ね計画通りに進めていた。

今後の研究の推進方策

来年度は、実験動物モデルを用いて、幹細胞培養上清、浄化濃縮幹細胞培養上清による創傷治癒へ効果を検証する。

次年度使用額が生じた理由

今年度は、浄化濃縮幹細胞培養上清機能解析の一環として、内皮細胞管腔形成実験を実施する予定だった。
新型コロナ感染症の影響で、前述実験実施するために必須である試薬「Corning社 Growth Factor Reduced (GFR) Basement Membrane Matrix Matrigel」の購入ができなくなったため、未使用額が生じた。
来年度、上記試薬購入するため、使用する予定である。

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2022

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 オープンアクセス 1件)

  • [雑誌論文] Purification and characterization of human adipose-resident microvascular endothelial progenitor cells2022

    • 著者名/発表者名
      Saito Natsumi、Shirado Takako、Funabashi-Eto Hitomi、Wu Yunyan、Mori Masanori、Asahi Rintaro、Yoshimura Kotaro
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 12 ページ: 1775

    • DOI

      10.1038/s41598-022-05760-4

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Adipose-Derived Stem Cell Conditioned Medium and Wound Healing: A Systematic Review2022

    • 著者名/発表者名
      Zhang Bihang、Wu Yunyan、Mori Masanori、Yoshimura Kotaro
    • 雑誌名

      Tissue Engineering Part B: Reviews

      巻: - ページ: -

    • DOI

      10.1089/ten.TEB.2021.0100

    • 査読あり

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公開日: 2022-12-28  

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