| 研究実績の概要 |
令和２年度研究計画に従い口腔癌由来がん関連線維芽細胞モデルの作成を行った。まず、歯肉癌由来のがん関連線維芽細胞のモデルを作成することとし、Ca9-22（歯肉癌）を使用し正常歯肉線維芽細胞と共培養ディッシュで１週間共培養を行い、Ca9-22由来がん関連線維芽細胞モデル（CAFモデル）を作成した。CAFモデルを作成した後に、total RNA抽出を行い、cDNAを作成した。その後定量RT-PCRを行い、これまでの研究者の研究成果を踏まえα-SMA,COX-2, MMP-1,MMP-2についてmRNAの発現を解析した。その結果、がん関連線維芽細胞のマーカーであるα-SMA mRNAの発現が上昇していた。また、炎症に関連するCOX-2のmRNA発現上昇、がんの浸潤・転移に関与するマトリクスメタロプロテイナーゼのMMP-1,MMP-2 のmRNA発現が上昇していた。ここで癌微小環境における歯肉がんと線維芽細胞の細胞間の相互作用を検索するため、Ca9-22と歯肉線維芽細胞の１週間の共培養の際にTGF-β抗体を添加したところ、通常の共培養で発現が上昇していたα-SMA ,COX-2,MMP-1,MMP-2 のmRNA発現が抑制された。このことからTGF-βが癌微小環境におけるがん細胞と間質の歯肉線維芽細胞の相互作用において重要な役割を担っていることが示唆された。また、がん関連線維芽細胞においてもがんの浸潤・転移に重要と考えられているMMPsが強く発現していることがわかった。今後、がん関連線維芽細胞のMMPs発現機序におけるTGF-βの役割ついてもさらなる解析を行いたいと考えている。これらの結果を踏まえ研究計画に従い、令和３年度も計画を進めていく予定である。
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