| 研究課題/領域番号 |
20K10192
|
|---|
| 研究機関 | 日本大学 |
|---|
研究代表者 |
岡田 明子 日本大学, 歯学部, 准教授 (10434078)
|
|---|
| 研究分担者 |
篠田 雅路 日本大学, 歯学部, 教授 (20362238)
岩田 幸一 日本大学, 歯学部, 特任教授 (60160115)
今村 佳樹 日本大学, 歯学部, 教授 (90176503)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
|
| キーワード | IFN-γ / 神経障害性疼痛 / ミクログリア / アストロサイト / pGluR1 |
|---|
| 研究実績の概要 |
三叉神経の障害により，口腔顔面領域の広範囲に及ぶ神経障害性疼痛を発症しやすくなるが，詳細は明らかにされておらず難治性である。本研究では，下顎の神経を支配する下歯槽神経を切断し，上顎の支配神経である上顎神経支配領域(V2)にまで異常疼痛を生じさせた神経障害性疼痛モデルラット(IAN)を作製し，神経障害性疼痛に付随する異常疼痛のメカニズムを解明することにした。IANのV2領域である口髭部への機械刺激に対する逃避反射閾値（HWT）は，神経切断後に有意な低下を認めたが，IFN-γ拮抗薬の投与によりその低下は認められなかった。また，IFN-γを三叉神経脊髄路核尾側亜核（Vc）に局所投与したラットのHWTは有意に低下した。IANの切断側Vc表層におけるIFN-γ受容体のたんぱく質量は有意に増加していた。また，VcにおけるミクログリアマーカーのIba1，アストロサイトマーカーのGFAP，神経細胞のマーカーであるNeuNとIFN-γ受容体の免疫二重染色では，GFAP陽性細胞だけに多くのIFN-γ受容体陽性発現が認められ，アストロサイト上にIFN-γ受容体が発現していることが示唆された。一方， IFN-γとアストロサイトのインヒビターであるFCの同時投与により，IFN-γ投与によるHWTの低下は抑制された。また，VcにおけるGFAPたんぱく質量はIFN-γの持続投与により有意に増加し，IFN-γとFCの同時投与にて有意に減少した。GFAP陽性発現量は，IFN-γの投与によりVc表層において有意に増加し，IFN-γとFCの同時投与にてその増加が抑制された。以上の結果より，三叉神経の損傷によりVcにおいて産生されたIFN-γがアストロサイト上のIFN-γ受容体と結合しアストロサイトが活性化され，広範囲のVc神経細胞が活性化されることにより神経障害性疼痛を引き起こす可能性が示唆された。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
当初の計画より研究は遅延している。当初計画していたグルタミン酸受容体の一つであるpGluR1のVc領域での陽性発現が明らかでなく，数社のpGluR1抗体で再免疫染色を行ったために時間を要した。また，コロナ禍による研究分担者の自宅待機などがあり，当初の予定通りの実験を進められなかった。
|
| 今後の研究の推進方策 |
IFN-γが口腔顔面領域の異所性神経障害性疼痛に関与することは示されたが，IFN-γがVcのどの細胞から産生されるかは不明である。よって，神経細胞，ミクログリアとアストロサイトの細胞培養を行い，ELISAキットを用いてIFN-γの同定を行いたい。さらに，電気生理学的解析により，IANラットのV２領域に機械刺激を与え，Vc侵害受容ニューロン応答の性質を詳細に調べたい。また，IANラットのVc領域にIFN-γ受容体アンタゴニストを局所投与し，Vc侵害受容ニューロン応答の変化を調べたい。今年は最終年度であり，これまでの結果を英語論文にまとめ国際論文に投稿する予定である。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
コロナウイルス禍により予定していた第２６回日本口腔顔面痛学会学術大会，The 20th scientific meeting of The Asian Academy of Orofacial Pain and Temporomandibular Disorders，第５０回日本慢性疼痛学会への発表がオンラインとなり，旅費が不要になったため残金が生じた。また，予定していた研究計画が遅延しており，それに伴い計画の後半に使用予定であった物品を購入しなかったため残金が生じた。
使用計画としては，繰越金と令和４年度助成金を合わせて，計画の後半に予定していた実験を進め，使用予定の抗体などの薬品を購入し，今年度は対面での開催予定である第２７回日本口腔顔面痛学会での発表を予定しており，その旅費に使用する予定である。
|
