| 研究課題/領域番号 |
20K10228
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
春山 直人 九州大学, 歯学研究院, 准教授 (70359529)
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| 研究分担者 |
寺尾 文恵 九州大学, 歯学研究院, 助教 (10510018)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 歯科矯正学 / カルシウムシグナル / 外胚葉異形成症 / 唾液腺 / 創傷治癒 / ストア作動性カルシウム流入 / Stim1 / Stim2 |
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| 研究実績の概要 |
カルシウムチャネロパチーとは、細胞内カルシウムイオン濃度の制御に関わるカルシウムチャネルおよびその関連タンパク分子の異常によって引き起こされる疾患の概念である。その疾患に、細胞の「ストア作動性カルシウム(Ca2+)流入 (SOCE) 」というメカニズムが関与していることが近年判明し、応募者はこれまで歯を主体とした上皮系組織におけるSOCE関連分子の役割を中心に研究してきた。
本研究では上皮系組織特異的STIM1/2遺伝子欠損マウスを用いて、1. in vivoでの歯・唾液腺・毛の表現型解析 と、2. 歯・唾液腺・毛包の器官・細胞培養系によるex vivo / in vitroでの細胞内Ca2+蛍光イメージングとシグナル伝達の分子生物学的解析を軸に、口腔のQoLに影響を与えるエナメル質形成不全や唾液腺分泌の機能異常に関連した、カルシウムチャネロパチーの病態を解明することを目的としている。
昨年度は、STIM遺伝子欠損マウスの唾液腺・毛を含めた表皮の表現型メカニズムの解析を主に実施してきた。唾液腺および皮膚組織から細胞を酵素処理にて単離し、単離した細胞内Ca2+濃度の変化の有無を分光分析装置にて蛍光色素Fura-2を用いて定量的に計測した結果、STIM遺伝子欠損マウスにおけるSOCEが減少していることが確認できた。
また、上皮組織特異的STIM1/2遺伝子欠損マウスにおける表皮創傷治癒について組織学的に解析したところ、上皮系組織特異的STIM1/2遺伝子欠損マウスにおける創傷治癒過程に変化がないことが示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
遺伝子欠損マウスを用いた表現型解析のうち、唾液腺を担当していた大学院生の退学により一部遅れている点がある。しかし、表皮における解析を一部先取りして実施しているため、全体としては概ね順調に推移していると判断した。
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| 今後の研究の推進方策 |
マウスにおける組織学的解析を継続するとともに、単離した細胞におけるSOCEの異常が遺伝子発現やシグナル伝達にどのような影響を及ぼしているかを、realtime PCR法やRNAseq法、Western blotting法で確認する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
研究情報収集のために参加した一部の学会が遠隔開催になったため、旅費の支出が請求額よりも少なくなったが、論文投稿料が予想より高額になったことから、結果として直接経費執行率は96.8%となった。次年度は最終年度となり、多数の消耗品を用いた実験実施を計画しているが、円高による消耗品価格高騰のため次年度使用額(33284円)については問題なく使用される予定である。
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