| 研究実績の概要 |
骨格筋は様々な因子により調節を受け、オートファジー機能不全によりサルコペニア (加齢性筋減弱症)が促進される可能性が高い (Sakuma K, et al., p62/SQSTM1 but not LC3 is accumulated in sarcopenia muscle of mice. Journal of Cachexia, Sarcopenia, and Muscle. 2016)。オートファジー機構を強力に阻害するものとして、最近注目を集めている物質がRubiconである (Nakamura S et al., Nature Commun 10: 847, 2019)。このRubiconはBeclin-1と結合することで、ライソゾームとオートファゴソームの合体を阻止する可能性がある。本研究では、加齢筋におけるRubiconとBeclin-1の変化について、蛍光免疫組織染色を用いて調べた。実験動物には若齢 (3ヶ月齢)と高齢 (24ヶ月齢)のC57Black/6J雄マウスを用いた。筋凍結横断切片 (8 μm)を用いた蛍光染色から、加齢筋におけるRubiconの免疫活性亢進が認められたが、Beclin-1の免疫活性については加齢にともなう明らかな変化が認められなかった。またRubiconの免疫活性亢進は、除神経を施した萎縮骨格筋においても同様に確認された。加齢筋におけるRubiconの活性亢進の場所は、筋細胞の細胞膜や個々の筋細胞質ではなく、細胞内にパーティクル (小片)上に散在していた。分画したタンパク質を用いたWestern blot法により、Rubiconタンパク質の加齢筋における変化のさらなる検証を行う予定である。また他のオートファジー関連物質であるアペリンについても、徐々に解析を進める予定である。
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