| 研究課題/領域番号 |
20K11515
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| 研究機関 | 岡山県立大学 |
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研究代表者 |
高橋 吉孝 岡山県立大学, 保健福祉学部, 教授 (10236333)
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| 研究分担者 |
川上 祐生 岡山県立大学, 保健福祉学部, 准教授 (30453202)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 血小板型12-リポキシゲナーゼ / 肝星細胞 / NASH |
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| 研究実績の概要 |
NASH進展における肝星細胞の活性化と筋線維芽細胞への分化の過程で、その発現レベルが上昇する血小板型12S-リポキシゲナーゼが、肝線維化の進行にどのように関わるかを明らかにするため、昨年度はヒト血小板型12S-リポキシゲナーゼを安定形質発現するヒト肝星細胞株を樹立し、コントロールのMock細胞と遺伝子発現プロファイルを比較したところ、ヒト血小板型12S-リポキシゲナーゼは、コラーゲンをコードするCOL1A1とCOL1A2の発現レベルを低下させることが示された。本年度は、血小板型12S-リポキシゲナーゼノックアウトマウスを購入し、メチオニン・コリン欠損食を8週間給餌することによりNASHモデルマウスを作成し、野生型マウスを用いて同様に作成したモデルマウスと肝の線維化のレベルをシリウスレッド染色により比較したところ、いずれのマウスも線維化は進行したが、シリウスレッド陽性面積の割合は、血小板型12S-リポキシゲナーゼノックアウトマウスの方が有意に高かった。このことから、血小板型12S-リポキシゲナーゼの発現が線維化を抑制することがin vivoでも示された。ヒト血小板型12S-リポキシゲナーゼ過剰発現細胞において、リアルタイムPCRで調べたTGF-β1受容体であるTGFBR2のmRNA量は、Mock細胞と比較して有意に低下していた。COL1A1とCOL1A2ならびにTGFBR2の低下は、過剰発現細胞にアラキドン酸を添加しても有意な低下が観察されなかった。以上のことから、血小板型12S-リポキシゲナーゼは、アラキドン酸以外の脂肪酸由来の生成物を介してTGFBR2の発現を低下させ、線維化を抑制することが示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
NASH進行過程における血小板型12S-リポキシゲナーゼの肝線維化に関わる役割を解明するための過剰発現細胞株の作成、ならびに血小板型12S-リポキシゲナーゼノックアウトマウスを用いたNASHモデルマウスの作成はいずれも成功し、期待通りの結果に基づいて遺伝子解析が順調に進んでいるため。
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| 今後の研究の推進方策 |
NASHモデルマウスの肝星細胞で発現が上昇する血小板型12-リポキシゲナーゼがどのような機構で肝線維化を抑制するか、過剰発現細胞とMock細胞のマイクロアレイ解析で網羅的に拾い出した遺伝子について、肝星細胞株を用いたノックダウン解析を進めるとともに、ノックアウトマウスを用いて作成したNASHモデルマウスにおける発現レベルの野生型マウスとの比較を進めて行く予定である。
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