| 研究課題/領域番号 |
20K12183
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| 研究機関 | 愛媛大学 |
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研究代表者 |
仲山 慶 愛媛大学, 沿岸環境科学研究センター, 講師 (80380286)
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| 研究分担者 |
北村 真一 愛媛大学, 沿岸環境科学研究センター, 准教授 (40448379)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 免疫毒性 / RNA-seq / コイ / サルモニシダ |
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| 研究実績の概要 |
体重約5 gのコイにA. salmonicidaを浸漬感染し，1週間後に外観症状を確認した上で，頭腎，体腎，肝膵臓をそれぞれ採取した。感染区（n = 4）と対照区（n = 3）ともに雄から採取した各臓器をRNA-seqに供し，得られたシーケンス結果に基づいて遺伝子発現解析を実施した。また，体腎への影響を評価するために，体重約7 gのコイにA. salmonicidaを感染し，感染3日後および7日後に左右の体腎を摘出し，片方を病理組織学的観察に，もう片方をA. salmonicidaの検出に用いた。
発症した個体においては，頭腎が肥大し，体腎に重篤な損傷が視認できた。RNA-seqの結果，頭腎，体腎，肝膵臓の各臓器からそれぞれ51626，55471，38780の転写産物の発現が検出され，そのうち1241，965，1393の発現量が有意に変動していた。発現量が減少した遺伝子を対象に遺伝子オントロジー（GO）解析を行ったところ，鉄イオンの恒常性維持（GO:0055072）をはじめとした最も多くのGO termが体腎で検出された。体腎の病理組織学的観察から，造血組織の壊死および炎症性細胞の浸潤，尿細管上皮細胞の混濁や壊死など明確な病変が確認され，GO解析の結果と矛盾しなかった。また，感染個体の体腎にA. salmonicidaが存在することが疑われた。以上の結果から，A. salmonicidaはコイの体腎の機能低下させることが予想され，腎機能の評価により発症の確認が可能であることが示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
コロナウイルス感染症対策によって，研究の実施を妨げる要因が複数存在した上，国際会議等での発表機会を持つことができなかったため。
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| 今後の研究の推進方策 |
遺伝子発現解析の結果から，魚類の免疫系に深く関与する分子がA. salmonicida感染のマーカー候補として絞り込まれた。同マーカー候補分子の測定法の構築および感染個体におけるマーカー分子の応答を確認する。さらに，これまでの成果をまとめ，国際誌に投稿する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
コロナ禍において，当初予定していた学会への参加を断念せざるを得なくなり，旅費を使用しなかったため。これまで得られた成果については，国際誌に投稿して公開するため，その投稿準備費として使用する。
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