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2021 年度 実施状況報告書

高着床能力胚の生産を目指した核成熟速度に対応したウシ卵子体外培養系の構築

研究課題

研究課題/領域番号 20K15681
研究機関大阪府立大学

研究代表者

古山 敬祐  大阪府立大学, 生命環境科学研究科, 講師 (50611026)

研究期間 (年度) 2020-04-01 – 2023-03-31
キーワードウシ卵子 / 個別培養 / 核成熟 / 機械学習 / 発生能
研究実績の概要

令和3年度は、高着床能力胚の生産を可能とする核成熟速度に対応したウシ卵子体外培養系を構築するために、「成熟培養(IVM)時における核成熟速度の非侵襲的な予測モデルの改善」と「モデルにより予測された各成熟速度とIVM動態および発生能との関連性の解析」を行った。まず、食肉処理場由来卵巣由来のウシ未成熟卵子卵丘細胞複合体(COC)を対象とし、個別培養系を用いて18時間IVMを実施した。IVM中、経時的にCOCの形態を撮影し、IVM後の核相を卵子毎に評価した。IVM後に第二減数分裂中期に達したかどうかの予測モデルを線形モデルおよび3種の機械学習(決定木、ニューラルネットワークおよびサポートベクターマシン)により作成し、その精度を比較した。その結果、サポートベクターマシンによるモデルはF値が最も高く(0.72)、感度は100%、適合率は53%であった。続いて、COC 109個を対象とし、IVMから発生培養までの全ての過程を個別培養および個別受精系を用いて実施し、胚盤胞への発生率を評価した。作成した予測モデルによって、IVM中のCOC形態から卵子の分類を行い、分類ごとにIVM中のCOC動態および発生率の比較を行った。卵子の直径やIVM前のCOC面積には違いはみられなかったが、核成熟が早いと予測された卵子はIVM 12時間以降のCOC面積が小さかった(P<0.05)。また、体外受精開始後7日目の胚盤胞への発生率に関しては違いが見られなかった。以上のことから、IVM時における核成熟速度の非侵襲的な予測モデルの改善には成功したが、モデルにより分類された卵子間での発生能に違いはないことが明らかになった。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

新型コロナウイルス感染症の影響により、実験のサポート実施してもらう予定であった大学院生の来日が遅れていたが、2022年3月に来日できた。研究の進捗は少し遅れているが、令和4年度での研究により、予定通りの研究が実施できる見込みである。

今後の研究の推進方策

令和4年度は、引き続き、これまでに作成した予測モデルによる核成熟速度の予測精度の改善を図る。また、発生培養中にタイムラプスカメラにより詳細に評価した卵割動態を用いて、核成熟速度と卵割動態との関係性を解析する。

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公開日: 2022-12-28  

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