| 研究実績の概要 |
本研究は，ミトコンドリア外膜に存在するAAA-ATPアーゼMsp1を介した誤配送タンパク質の配送やり直し（校正）の分子基盤を解明することを目的とした．本年度において申請者らは，ミトコンドリア外膜に誤配送されたテイルアンカー型（TA）タンパク質が，Msp1によって外膜から引き抜かれた後にGuided Entry of Tail-Anchored proteins（GET）経路を介して小胞体（ER）に移動する分子機構を明らかにした（Matsumoto, S., Ono, S., et al., J. Cell Biol., 2022）．そして，申請者らは，クライオ電子顕微鏡を用いた単粒子解析によって耐熱性酵母由来Msp1の可溶性領域の構造を2.8Å分解能で決定した．構造解析の結果からMsp1は，各サブユニットが右巻きのらせん階段状に集合したホモ六量体のリング構造となっていた．Msp1の各サブユニット間にはATPの結合が確認され，Msp1六量体のリング中心には基質を模倣したペプチドの結合が観察された．我々が明らかにしたMsp1の構造について，これまでに報告されている好熱性真菌とヒト由来のMsp1の構造と比較すると，リング中央の基質認識に関与するアミノ酸残基が同一でありながら，認識に関わるサブユニットが異なっていた．次に，申請者らは，ペルオキシソーム膜タンパク質（PMP）の誤局在がMsp1により校正されるのかどうか，解析を進めた。具体的には，オーキシン誘導型分解法によりPMP輸送因子Pex19を急速分解できる酵母株を作製し，ペルオキシソーム膜が維持された状態を保ちながら，いくつかのPMPを効率的にミトコンドリアに誤配送できるシステムを構築した．
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