| 研究課題/領域番号 |
20K16225
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| 研究機関 | 名古屋市立大学 |
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研究代表者 |
加藤 寛之 名古屋市立大学, 大学院医学研究科実験病態病理学, 助教 (80791293)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 膵癌 / DPYD / 5-FU / STAT3 / Luteoiln / KPCマウス |
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| 研究実績の概要 |
本研究はフラボイドの１種であるLuteolinがSTAT3-DPYD経路を介して膵発癌の抑制をするという我々の研究を元に、DPYDは5-FUの分解酵素である事に着目し、5-FUとLuteolinによる膵癌治療における相乗効果を検討しDPYDの制御機構をより詳細に明らかにする事が目的である。本年度は予定ではshDPYDによるDPYD抑制株の作成を予定していたが、DPYDをCSⅡ-CMV-MCS-IES2-Bsd ベクターを用いてDPYD低発現膵癌細胞株である8988Ｔ、AsPC1に強制発現させた細胞株を作成し実験に用いた。DPYD強制発現細胞株ではpSTAT3発現、増殖能が増加する事を見いだしDPYDとSTAT3は相互依存の関係であることが分かり、DPYDの発現自身が増殖能に寄与することを見いだした。また、両者とも低容量の5-FU投与においてはDPYD高発現細胞株で感受性が低い事が分かり、DPYD高発現は5-FUの治療抵抗性に寄与することを見いだした。
また、DPYDのプロモーター領域のMotif AssayからDPYDの発現調節にはE2F1, COUP-TF1が関与している可能性があり、タンパク、mRNA発現を検討するとCOUP-TF1はLut投与により発現が低下し、STAT3発現抑制によっても発現が低下している事が分かりSTAT3-DPYD経路に関与している事が示唆された。KPCマウスを用いた5-FUとLuteolinの相乗効果についてはKPCマウスの確保に難渋し現在実験を行っている最中である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
in vitroの解析においては順調に進んでいるが、KPCマウスモデルに関しては、KPCマウス(♂)の確保に難渋し、実験を２回に分けて行っているためやや進行が遅れている。
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| 今後の研究の推進方策 |
比較的順調に解析は進んでいるが、動物実験にやや遅れがでているため、皮下移植のモデルを併用しながら実験を進めていく。またin vitroに関しては本年に細胞の網羅的解析を行い、DPYD制御機構に関してデータの収集を行っていく。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
コロナウイルス感染による緊急事態宣言等により、当該施設の動物実験を始めることが困難となりました。そのため動物実験のスタートの遅れが影響したため、使用予定金額に達しなかっため、次年度に繰り越し、繰り越した金額をそのまま動物実験の使用に当てる予定である。
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