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骨肉腫細胞内で生じる翻訳後タンパク糖鎖修飾が、腫瘍細胞の生存および増殖にどのように関わるかを解明し、またその阻害が新たな治療標的となりうるかを検討するために、計画した研究を遂行した。前年度までに関連遺伝子のノックダウン前後で生じるリン酸化シグナルタンパクの変化を網羅的に測定し、また同様に遺伝子発現状況の変化についても網羅的な測定を行った。糖鎖修飾が特定の細胞増殖シグナル経路の維持および細胞周期関連遺伝子の機能維持に必要であり、糖鎖修飾関連遺伝子の阻害によりこの経路が阻害され、細胞増殖を抑制することができることが示された。本年度はこれらの結果をもとに、候補遺伝子のノックダウンに伴う細胞内糖鎖修飾状況の変化を網羅的に観察した。ノックダウンの有無により細胞内の糖鎖修飾状況のプロファイルは増強・減弱の両方に変化し、一部のタンパクにおいてノックダウンによる糖鎖修飾の大きな減弱がみられた。これらのタンパクが骨肉腫の細胞内機能、特に生存および増殖に関与している可能性があり、候補遺伝子の治療標的としての重要性の理解が深まった。動物実験においては、薬剤誘導性に候補遺伝子のノックダウンが行える腫瘍細胞株を用いて免疫抑制マウスにおける生体内で作成した腫瘍に対する候補遺伝子のノックダウン実験とその評価を実施し、生体内でも候補遺伝子が腫瘍増大に重要な役割を果たしていることを確認した。今後はこれらの成果をもとに、候補とした遺伝子を標的とした治療の実用化に向けた機能解析をさらにすすめる予定である。
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