我々はこれまでにMyostatinの刺激により、マウス筋芽細胞株C2C12を腱組織の恒常性維持や損傷後の修復において重要な役割をなす腱細胞へ効率的に分化させる 培養系を確立し、そのシグナル伝達経路を明らかにした。本研究ではより未分化な間葉系細胞株C3H10T1/2から腱細胞への分化を誘導する新たな培養系を用い、 1)Myostatinによる未分化間葉系細胞の腱細胞への分化誘導時に活性化されるシグナル伝達経路、2)Myostatinの拮抗蛋白であるFollistainの腱細胞分化における 機能、3)Myostatinの生体内に存在する腱幹/前駆細胞から腱細胞への分化に与える影響、の3点を解明する。 これまでの研究においてリアルタイムPCRにおいてMyastatinは未分化間葉系細胞から腱細胞への分化誘導促進する効果があることが明らかになった。 当該年度では1)において、タンパクレベルにおいても腱分化誘導されていることを確認するためウェスタンブロットによる検討を行ったが、条件どりが難しく、タンパクレベルでも分化誘導されていることの確認はできなかった。同培養系を用いてMyostatinの拮抗蛋白であるFollistatinの腱細胞分化に与える影響を腱細胞マーカーについてリアルタイム PCRによる定量を行い、解析を行なった。FollistatinはMyostatinの腱細胞分化抑制作用を持つことが明らかにできた。
|