| 研究課題/領域番号 |
20K18399
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| 研究機関 | 関西医科大学 |
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研究代表者 |
大庭 慎平 関西医科大学, 医学部, 助教 (60759538)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 網膜静脈閉塞症 / 無灌流領域 |
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| 研究実績の概要 |
網膜静脈閉塞症（Retinal Bein Occlusion、以下RVO）は、網膜静脈が閉塞することにより、閉塞領域の網膜虚血を生じ、やがて、病的新生血管が発生し病状が悪化する。慢性期に側副血行路が自然に形成され、治療なしで病状が改善する例がある一方、無灌流域（Non-perfusion area : NPA)から病的新生血管が発生し病状が悪化する例も多い。治療としてはレーザ－光凝固や抗VEGF薬の硝子体注入を行うが、対症的な治療の領域を出ない。我々は、マウスを用い実験的RVOモデルを作成し、それにおける側副血行形成過程を観察、またどのような因子が働いているのかを精査する。
それによって、人為的に生理的新生血管が生じるメカニズムが解明できれば、将来的な新たな治療法に結びつく可能性がある。目標としては以下の３点。１、網膜静脈分枝閉塞症による広範なNPAを再現した動物モデルを確立する。２、無灌流領域となった部分の網膜血管の退縮を観察し、病態に迫る。３、網膜血管の退縮を抑制する方法を検討し、臨床への応用を図る。
実験方法は以下。１、生後2か月のadultマウス（BALB/Cマウス）に全身麻酔下（塩酸ケタミンと塩酸キシラジンを腹腔内に投与）で網膜光凝固を行う。網膜光凝固を行う際には事前に光感受性物質であるロ－ズベンガル液を腹腔内に注射する。数日後にNPAが形成されたかどうかを光干渉断層網膜血管造影Optic coherence tomography angiography（OCTA）を用いて確認する。２、その個体に尾静脈からフルオレセイン/デキストランを注入後、眼球を摘出、網膜を展開してフラットマウント標本を作成する。血管内皮CD31を染色し、網膜血管の退縮する日数、退縮様式を検討する。３、側副血行路を促進するSEWなどをマウスに注入し、無灌流領域の形成が抑制されるかどうかを検討する
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
①となりあった静脈３本に対して網膜光凝固術を行うと、約80%の確率で広範なNPAを形成することができた。しかしこのモデルからは６０日まで経過しても網膜新生血管は発生しなかった。
②網膜光凝固術後、8日から15日の間で深層、浅層の網膜血管から退縮し、最後に中間層が退縮することがわかった。
③SEWを注入したマウスに光凝固を行い、術後１週間、２週間、３週間と観察したが、最初に形成されたNPAに網膜血管が再灌流することはなかった。
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| 今後の研究の推進方策 |
NPAに側副血行路を形成させることはできなかった。今後はNPA内の網膜血管が不可逆的な状態まで退縮する過程、関連する因子を、分子生物学的な検討を行いより詳しく検討する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
実験の進捗具合により物品の納期が遅れたため。
今後分子生物学的な検討、組織学的な免疫染色用抗体など使用する。
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