本研究ののちに実施を目指している臨床研究では、他治験のために構築された細胞バンクの歯根膜由来MSCを用いる予定である。本研究では、実際に使用するこの細胞バンクの細胞を用いてヒト歯根膜由来 MSCシートを作製し、本治療法にとって最も条件の良いMSC シートの作製方法をELISAによるタンパク質分泌や物性、組織学的な解析を行なうことで検討した。一定の条件下で培養して作製した歯根膜由来MSCシートは移植に十分な物性を持ち、有効成分であるVEGFやHGFも十分量分泌していることを確認した。また、臨床研究のためのトランスレーショナルリサーチとしてビーグル犬モデルの作製を行なった。ゾレドロン酸とデキサメタゾンを投与したビーグル犬の顎骨の歯肉を剥離し顎骨を切削することでビーグル犬モデルを作製した。本研究で確立した条件では安定してビーグル犬の下顎骨に腐骨を認め、骨が口腔内に露出したモデルが作製可能であった。MSCシートによる新規プレート再建方法の検討を行うため、ラットを用いた移植実験を行なった。ゾレドロン酸とデキサメタゾンを投与したラットにチタンプレートの埋入とともに MSCシートを同時に移植し、待機期間を置いた後に組織を採取し、組織学的にチタンプレート周囲組織を検討した。ゾレドロン酸とデキサメタゾンを投与したラットでは、顎骨に埋入したチタンプレートの周囲に炎症が惹起されたが、MSCシートを同時に移植したラットでは有意にチタンプレート周囲の顎骨の炎症が抑制されていた。
|