| 研究課題/領域番号 |
20K18837
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| 研究機関 | 鶴見大学 |
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研究代表者 |
宮之原 真由 鶴見大学, 歯学部, 学部助手 (70460186)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2025-03-31
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| キーワード | クオラムセンシング分子 / Farnesol / Candida albicans / リアルタイム細胞ア ナライザー |
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| 研究実績の概要 |
システマティックレビューによる「Early Childhood CariesとCandida albicans口腔感染との関連」が複数の研究グループから報告された。しかし、従来のStreptococcus mutansを中心とする齲蝕病因論の中で、真菌であるC. albicansは齲蝕発症に関する因子を持たないため齲蝕誘発メカニズムを説明することは、現在までの知見では不可能である。そこで、「C. albicansの細胞外分泌情報伝達物質が、間接的にS. mutansの齲蝕病原性を亢進させる」という仮説を立てた。C. albicans特異的情報伝達物質としてC. albicansのクオラムセンシング分子（Farnesol）に焦点を当て、S. mutansの齲蝕病原性に直接関与する「ショ糖依存性バイオフィルム形成能」への影響を評価する。研究の目的は「S. mutansの齲蝕病原性を亢進させるC. albicansのクオラムセンシング分子の解明」である。本研究の具体的なS. mutansの齲蝕病原性とは、ショ糖依存性菌体外不溶性グルカンの産生であり、C. albicansのクオラムセンシング分子とはFarnesolを指す。研究の成果は、疫学研究で得られた「EarlyChildhood CariesとCandida albicans口腔感染との関連」に生物学的妥当性を与える。
2023年度は、Candida albicans（標準株、臨床株）に様々な濃度のクオラムセンシング分子（Farnesol）を用いて、リアルタイム細胞アナライザーにて、C. albicans S. mutansのショ糖依存性不溶性グルカン産生促進効果を増殖曲線から明らかにし、Farnesolの濃度別にショ糖依存性不溶性グルカン産生量、産生時間を調べた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
コロナ禍の余波により、今まで使用していた海外からの試薬の入荷のめどが立たず、新たに試薬を選出し、2023年度は本研究をほぼ最初からやり直した。
新たな培養条件を確立し、最初から実験を再度行い、リアルタイム細胞アナライザーにて、Candida albicans、Streptococcus mutansにおけるクオラムセンシング分子（Farnesol）を用いてショ糖依存性不溶性グルカン産生促進効果を調べていたために遅れを生じている。
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| 今後の研究の推進方策 |
2023年度はC. albicans特異的クオラムセンシング分子であるFarnesol、および分泌Farnesolを含むC. albicansの培養上清による、S. mutansのショ糖依存性不
溶性グルカン産生促進効果を明らかにし、リアルタイム細胞アナライザー用いて、C. albicansの培養上清を獲得した。非水溶性グルカン産生酵素コード遺伝子
（gtfB、gtfC)発現評価を行い、2024年度は研究成果をまとめて論文とし、国際誌へ投稿準備を進めている。そのための追加実験を行う予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
2022年度まで、オンラインの学会が多く、旅費を繰り越すとなった。コロナ禍が終えても、その影響は大きく、海外の試薬の入荷の遅れ、廃版が相次いだ。また、業者の廃業により予定していた試薬の購入が困難であった。2023年度には牛歯の購入を希望していたが、必要量が確保できなく、2024年度購入予定である。
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