| 研究実績の概要 |
生体内では、がん化した異常細胞の攻撃役としてT細胞が用意されており、このT細胞を活性状態で維持すれば、がんの種類とは無関係に殺傷することが出来る。しかしながら、がん細胞の中には攻撃を回避するためのツールとしてPD-L1を発現しているものがある。T細胞上のPD-1が、がん細胞上のPD-L1により不活性化されると病態は悪化する。そこで、本研究では、高い抗がん作用を発揮する機能性分子として、PD-1とPD-L1の双方に作用するハイブリッド型抗体酵素の作製を進めている。今年度の実施内容は以下の通りである。
(1)PD-L1に対するスーパー抗体酵素の作製：昨年度、合成方法の変更により2種類のFRET修飾したPD-L1 peptideを用意することが出来た。これらを用いたスクリーニングにより、PD-L1 peptideを分解する新たなクローンとしてNo1やNo7を見出した。
(2)scFv-type bifunctional catalytic antibody（scFv-CAと略す）の作製：H34は、PD-1を酵素的に切断するクローンである。今年度はPD-L1を分解するNo7クローンを見出したので、H34とNo7を遺伝子工学的に繋げて、scFv-typeのbifunctional catalytic antibodyを設計し、大腸菌の系で発現・精製した。
(3) scFv-CAの反応性：蛍光基としてEDANSを使用するFRET-PD-1, FRET-PD-L1 peptideを新たに合成した。蛍光基としてMCAを使用するpeptideと組み合わせて使用することで、scFv-CAの反応性を解析した。その結果、scFv-CAがPD-L1とPD1を分解することが分かった。PD-L1に対する反応性はNo7単独と同等であったが、PD-1に対する反応性はH34単独より低下していた。
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