医・歯・看護の医療連携を飛躍させる「歯周病関連疾患の一括予測リキッドバイオシー」

2021 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20K21714
• 研究機関: 徳島大学
• 研究代表者: 吉田 賀弥 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 准教授 (60363157)
• 研究分担者: 岡村 裕彦 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 教授 (20380024)
• 研究期間 (年度): 2020-07-30 – 2022-03-31
• キーワード: exosome / リキッドバイオプシー / 歯周病関連疾患 / 糖尿病 / micro RNA

研究実績の概要

本研究では、「歯周病原菌に感染したマクロファージ」が、全身疾患を背景とした様々な環境下で放出するexosomeを中のmicro RNAを同定し、多種類の歯周病関連疾患発症を一括に予測するリキッドバイオプシーの確立を目指し実験を行った。昨年度までに、ヒトマクロファージ細胞株THP-1細胞に歯周病菌Porphyromonas gingivalisを感染させ、培地中に放出されたexosomeを抽出する方法や、得られたexosomeからmicro RNAを抽出し、次世代シークエンサーにより塩基配列を解析する手技を確立した。本年度は、代表的な歯周病関連疾患である糖尿病に着目し、歯周病が糖尿病を発症させるリスクをスクリーニングし得るmicro RNAの同定を目指した。
1. 糖尿病発症に特異的なexosome含有micro RNAの同定
糖尿病を模倣する培養条件として、高グルコース及び最終糖酸化物AGE存在下で、THP-1を培養し、上述と同様の方法で、exosomeに含有されるmicro RNAを同定した。高グルコース下でPg感染によりexosome内への含有が増加するmicro RNA　118種類（内、４倍以上の変化を示すmicro RNA は23種類）、減少するmicro RNA 177種類（内、４倍以上は44種類）であった。AGEについては、同様に、増加micro RNA 192種類（43種類）、減少micro RNA 198種類（27種類）であった。
2. 高グルコースとAGEの両条件に共通して増加するmicro RNAとして32種類の、減少するmicro RNAとして54種類を、候補として絞り込んだ。さらに、その中から、データベースを活用し、数種類を最有力な増加micro RNAとした。

研究成果

• [雑誌論文] Extracellular vesicles of P. gingivalis-infected macrophages induce lung injury (2021)
  • 著者名/発表者名: Yoshida Kayo、Yoshida Kaya、Fujiwara Natsumi、Seyama Mariko、Ono Kisho、Kawai Hotaka、Guo Jiajie、Wang Ziyi、Weng Yao、Yu Yaqiong、Uchida-Fukuhara Yoko、Ikegame Mika、Sasaki Akira、Nagatsuka Hitoshi、Kamioka Hiroshi、Okamura Hirohiko、Ozaki Kazumi
  • 雑誌名: Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Basis of Disease 巻: 1867 ページ: 166236～166236
  • DOI: 10.1016/j.bbadis.2021.166236
  • 査読あり