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2021 年度 実績報告書

新しい分化誘導技術「モルフォロジカルダイレクトリプログラミング」の開発

研究課題

研究課題/領域番号 20K21904
研究機関熊本大学

研究代表者

森田 康之  熊本大学, 大学院先端科学研究部(工), 教授 (90380534)

研究分担者 小俣 誠二  熊本大学, 大学院先端科学研究部(工), 助教 (60624814)
研究期間 (年度) 2020-07-30 – 2022-03-31
キーワードマイクロパターニング / モルフォロジー / 線維芽細胞 / アストロサイト
研究実績の概要

最終年度は,以下の内容で取り組んだ.(1)スタート細胞として,ヒト新生児皮膚線維芽細胞を使用した.(2)ターゲット細胞には,脳神経アストロサイトを使用した.数日間培養した後,位相差顕微鏡による形態画像を取得した.エッジ処理などの画像処理を施し,アストロサイトの形態をパターン化した.(3)フォトリソグラフィを使用し,ガラスウェハ上にターゲット細胞の形状を反転させたパターンをもつモールドを作製した.そのモールドに培養基板となるPDMSを流し込み,成形した.そして,PDMSの細胞培養基板上にターゲット細胞の形状が凸型としての作製に成功した.その後,細胞培養基板上のターゲット細胞の形状をした凸部に細胞接着分子であるフィブロネクチンをコーティングした.(4)ターゲット細胞の1つのパターン上に,1個のスタート細胞を効果的に播種する必要があるため,細胞濃度について検討した.(5)免疫蛍光蛍光染色として,細胞核を染色するDAPI,およびアストロサイトに特異的に発現するGFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein)を使用した.そして次に示す結果を得た.(1)細胞濃度が増加するにつれて,パターン上への細胞の播種割合は増加していくが,複数個の細胞が播種される割合が大幅に増加する.本研究では,1つのパターン上に1個の細胞の播種割合が最も高かった1.0×10^5 cells/cm^2の細胞濃度を採用した.(2)細胞核とほぼ同じ位置に,アストロサイトの分化マーカーであるGFAPの発現が観察された.この結果は,スタート細胞をターゲット細胞の形状に制御することにより,スタート細胞がターゲット細胞へ分化する可能性を示唆している.

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2022 2021

すべて 学会発表 (2件) (うち国際学会 1件、 招待講演 1件) 図書 (1件)

  • [学会発表] DVC Measurement on a Mechanical Interaction between Cancer Spheroid and Extracellular Matrix2021

    • 著者名/発表者名
      Y. Morita, Y. Nakano, K. Oshima, Y. Toku, Y. Ju
    • 学会等名
      2021 SEM Annual Conference and Exposition on Experimental and Applied Mechanics
    • 国際学会
  • [学会発表] 物体内部の変形を可視化する3Dデジタル画像相関法2021

    • 著者名/発表者名
      森田康之
    • 学会等名
      第36回日本整形外科学会基礎学術集会
    • 招待講演
  • [図書] Multidisciplinary Computational Anatomy2022

    • 著者名/発表者名
      Y. Morita
    • 総ページ数
      5
    • 出版者
      Springer
    • ISBN
      978-981-16-4324-8

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公開日: 2022-12-28  

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