本研究では、放線菌 Streptomyces calvus T-3018 が生産するヌクレオチド天然物nucleocidin の生合成経路における、リボース骨格へのフッ素原子の導入および、スルファメート部位の形成を含む生合成経路の解明を目的とし、 遺伝子破壊実験と in vitro 酵素反応解析を計画した。生合成遺伝子クラスターに含まれる遺伝子を網羅的に破壊することにより、生合成に必須である遺伝子を同定し、生合成機構を提唱した。生合成を担うと考えられる酵素を可溶性タンパク質として大腸菌または放線菌から異種発現、精製し、生合成初期段階における酵素の機能を同定した。
|