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本研究では、乳歯歯髄由来間葉系幹細胞（SHED）およびSHEDの培養上清（SHED-CM）を用いた顎裂部骨再生治療を確立するため、SHED-CM中の骨再生に有用な液性因子を解明することを目的とする。
これまでに、SHED-CMの生体内における骨再生能を評価するため、免疫不全マウスの頭蓋冠骨欠損部にSHEDおよびSHED-CMを移植した。SHED群およびSHED-CM群において有意な骨再生が認められ、骨再生能を有している事を解明した。さらに、SHED-CMに含有するタンパク質について網羅的定量解析結果を得ることができた。
2022年度には、前年度に引き続きin vitroの実験を行なった。実験には、ヒト由来血管内皮細胞株 (HUVEC)、マウス頭蓋冠由来骨芽細胞株 (MC3T3-E1)、ヒト骨髄由来間葉系幹細胞（hBMSCs）を用いた。各細胞を培養し、SHED-CM 抽出成分を添加し、細胞増殖能、各細胞増殖時の動態変化、骨代謝因子・血管新生マーカーの発現レベルについて遺伝子解析およびwestern blot 解析を行った。SHED-CM群において細胞増殖が有意に認められ、骨代謝因子・血管新生マーカーの遺伝子発現に有意な亢進が認められた。さらに、SHED-CMに含まれるタンパク質の定量解析の結果から解明された液性因子について、抗中和抗体を添加し、細胞増殖能および骨形成能を検証した。これまでのin vitroの実験の結果をまとめ、論文の投稿を行なった。
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