| 研究課題/領域番号 |
20K23075
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
渡邊 純奈 名古屋大学, 医学部附属病院, 医員 (00877102)
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| 研究期間 (年度) |
2020-09-11 – 2023-03-31
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| キーワード | 細胞老化 |
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| 研究実績の概要 |
育休を取得していため研究実績がない。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
育休を取得していため研究実績がない。
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| 今後の研究の推進方策 |
令和２年度は当初の予定通りに研究を遂行することができなかったため、令和２年度の研究計画は令和３年度に、令和３年度の研究計画は令和４年度に実施する予定とする。
具体的には、 令和３年度に ①薬剤性細胞老化の解析 in vivoではラットMRONJモデルの作成とその評価（組織学的、遺伝学的；p21経路への影響、SASP）、in virtoでは破骨細胞 、骨髄細胞、線維芽細胞に作用させて評価（組織学的、遺伝学的）する。 ②細胞内代謝の解析 in vivoではラットのNAD+・乳酸の測定、in virtoではミトコンドリアを観察（共焦点細胞イメージアナライザー使用）する 。
また、令和３年度から４年度にかけて、 ③miRNAの標的遺伝子を同定、タンパク質レベルでの発現変化を測定（ルシフェラーゼベクターの作成、ルシフェラーゼアッセイ）、レンチウイルスを介したトランスダクションによりEVsに特定のmiRNAを導入する（XMIR Exosome miRNA Packaging Systemの利用）。 ④MRONJモデルラットに対するmiRNAの老化抑制・創傷治癒効果（in vivo/ in vitro） 目的miRNAを取り込ませたEVsによる、細胞機能のノックダウン、EVsによるmiRNA輸送経路の解析、EVs受容細胞におけるmiRNA 標的遺伝子の発現調節の解析をする。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
育休中であったため、令和２年度は研究費を使用しなかった。1年の延長を申請し、計画を1年ずらして遂行していく予定である。
具体的には、 令和３年度 ①薬剤性細胞老化の解析 in vivoではラットMRONJモデルの作成とその評価（組織学的、遺伝学的；p21経路への影響、SASP）、in virtoでは破骨細胞 、骨髄細胞、線維芽細胞に作用させて評価（組織学的、遺伝学的）する。 ②細胞内代謝の解析 in vivoではラットのNAD+・乳酸の測定、in virtoではミトコンドリアを観察（共焦点細胞イメージアナライザー使用）する 。
また、令和３年度から４年度にかけて、 ③miRNAの標的遺伝子を同定、タンパク質レベルでの発現変化を測定（ルシフェラーゼベクターの作成、ルシフェラーゼアッセイ）、レンチウイルスを介したトランスダクションによりEVsに特定のmiRNAを導入する（XMIR Exosome miRNA Packaging System）。 ④MRONJモデルラットに対するmiRNAの老化抑制・創傷治癒効果（in vivo/ in vitro） 目的miRNAを取り込ませたEVsによる、細胞機能のノックダウン、EVsによるmiRNA輸送経路の解析、EVs受容細胞におけるmiRNA 標的遺伝子の発現調節の解析をする。
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