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2021 年度 実施状況報告書

タイにおける健常小児口腔微生物叢の構造解明とメタゲノムワイド関連解析

研究課題

研究課題/領域番号 20KK0210
研究機関大阪大学

研究代表者

川端 重忠  大阪大学, 歯学研究科, 教授 (50273694)

研究分担者 山口 雅也  大阪大学, 歯学研究科, 講師 (00714536)
広瀬 雄二郎  大阪大学, 歯学研究科, 特任研究員 (90788407)
研究期間 (年度) 2020-10-27 – 2023-03-31
キーワード口腔細菌叢 / 細菌シングルセル解析 / メタゲノム解析 / 唾液 / 早期小児う蝕
研究実績の概要

本研究計画では、タイにおける健常および重度の早期小児う蝕の小児の口腔微生物叢について解析を行い、微生物叢全体の遺伝子解析に加えて個別の菌体のゲノム配列の決定を試みる。得られたゲノム情報から、薬剤耐性遺伝子の分布、ならびに培養不能菌の代謝経路の決定を行う。さらに、早期小児う蝕と相関を示す微生物叢中の菌種または遺伝子の検出を試みるものである。
今年度においてはタイ側にて倫理審査の承認を得て、新型コロナ感染症の状況が落ち着き次第、検体を採取できる状況を整えた。しかし、今年度はタイにおける新型コロナ感染症の感染拡大が続き、検体採取の許可がおりなかった。そこで、検体を採取次第、解析を実行可能とするべく、情報解析環境の構築を行った。これまで利用していた国立遺伝学研究所のスーパーコンピュータシステムに加え、大阪大学に新たに設置されたスーパーコンピュータシステムSQUIDについて利用許可を得た。情報解析環境として、主にSingularityを用いたコンテナシステムによる解析を行い、異なる環境へのプログラム導入に関わる問題を回避し、速やかな解析環境再現を行うこととした。一方で、一部の解析プログラムについては、Singularity上でうまく作動しないことから、スーパーコンピュータ上のローカル領域へのインストールを行うことで対応した。また、小規模のデータだけでなく、大規模のデータにも対応できるよう、確保メモリなどの解析条件の検討を行った。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

新型コロナ感染症の問題により、倫理審査は通過したが、検体の採取が許可されないため。

今後の研究の推進方策

新型コロナ感染症の状況が落ち着き、タイにおいて検体の採取許可が出次第、全身状態が健常な小児集団を選出する。同意が得られた被験者全員から微生物叢検体として、唾液と歯面プラークを収集する。重度ECCの解析については、得られた群より、口腔内状況に基づき、カリエスフリーな集団と重度ECCの集団をさらに選出し、比較を行う。
得られた各検体について、16S rRNAを用いた細菌叢解析に加え、IST1を用いた真菌叢解析を行う。併せてメタゲノムショットガン解析によって細菌叢中の遺伝子を同定する。薬剤耐性遺伝子については、遺伝子マッピングプログラムと耐性遺伝子データベースを利用して検索する。メタゲノム解析の結果から、患者および対照群の典型例について、シングルセルゲノム解析を行う。
微生物叢のパンゲノム解析ならびにコアゲノム解析を行い、得られたSNPおよび各遺伝子について、MWASの解析プログラムや次元削減法を用いて、う蝕発症または抑制と相関する菌種、遺伝子の同定を試みる。

次年度使用額が生じた理由

新型コロナ感染症により、タイでの検体採取が許可されなかったため、次年度使用額が生じた。次年度は検体を収集し、各種の次世代シーケンス解析と情報解析を行うのに必要な予算を使用する。また、得られた成果を発表するため、英文校正費、論文投稿費またはオープンアクセス費を支払う。

  • 研究成果

    (31件)

すべて 2022 2021 その他

すべて 国際共同研究 (1件) 雑誌論文 (4件) (うち国際共著 2件、 査読あり 3件、 オープンアクセス 3件) 学会発表 (14件) (うち国際学会 3件、 招待講演 3件) 図書 (11件) 備考 (1件)

  • [国際共同研究] マヒドン大学(タイ)

    • 国名
      タイ
    • 外国機関名
      マヒドン大学
  • [雑誌論文] インフルエンザに合併する細菌性肺炎の重要性2022

    • 著者名/発表者名
      住友倫子,川端重忠.
    • 雑誌名

      歯界月報

      巻: 848 ページ: 1-6

  • [雑誌論文] GP96 drives exacerbation of secondary bacterial pneumonia following influenza A virus infection.2021

    • 著者名/発表者名
      Sumitomo T, Nakata M, Nagase S, Takahara Y, Honda-Ogawa M, Mori Y, Akamatsu Y, Yamaguchi M, Okamoto S, Kawabata S.
    • 雑誌名

      mBio

      巻: 12 ページ: e0326920

    • DOI

      10.1128/mBio.03269-20

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Unique virulence role of post-translocational chaperone PrsA in shaping Streptococcus pyogenes secretome.2021

    • 著者名/発表者名
      Wu Z.Y, Campeau A, Liu C.H, Gonzalez D.J, Yamaguchi M, Kawabata S, Lu C.H, Lai C.Y, Chiu H.C, Chang Y.C.
    • 雑誌名

      Virulence

      巻: 12 ページ: 2633-2647

    • DOI

      10.1080/21505594.2021.1982501

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Editorial: Host-pathogen Interactions During Pneumococcal Infection2021

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi M, Kinjo Y, Nizet V
    • 雑誌名

      Frontiers in Cellular and Infection Microbiology

      巻: 11 ページ: 752959

    • DOI

      10.3389/fcimb.2021.752959

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [学会発表] ウイルス感染に合併する細菌性肺炎の病態増悪機構.2022

    • 著者名/発表者名
      住友倫子,川端重忠.
    • 学会等名
      第95回日本細菌学会総会
    • 招待講演
  • [学会発表] 肺炎球菌のニューモライシンによる鼻粘膜上皮バリアの障害と脳伝播機構の解析.2022

    • 著者名/発表者名
      高原悠樹,住友倫子,河野正充,山口雅也,中田匡宣,保富宗城,川端重忠.
    • 学会等名
      第95回日本細菌学会総会
  • [学会発表] 老化により肺炎球菌感染症が重症化する機構のマウスモデルを用いた探索.2022

    • 著者名/発表者名
      山口雅也,川西邦夫,小林桃子,元岡大祐,奥崎大介,川端重忠.
    • 学会等名
      第95回日本細菌学会総会
  • [学会発表] ゲノムワイド関連解析に基づくemm89型化膿レンサ球菌感染症の劇症化因子の探索.2021

    • 著者名/発表者名
      大野誠之,山口雅也,広瀬雄二郎,住友倫子,池辺忠義,河原隆二,奥野ルミ,松本裕子,秋山由美,川端重忠.
    • 学会等名
      第95回日本感染症学会学術講演会
  • [学会発表] Molecular Evolutionary and Microbiological Approach to Investigate Pneumococcal Infection.2021

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi M.
    • 学会等名
      International Turkish Japanese Dentistry Congress 2nd Ankara-Osaka University Dental Workshop Scientific Program
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] シングルセル解析を用いた口腔細菌叢のゲノムプロファイリング.2021

    • 著者名/発表者名
      山口雅也,内橋俊大,川端重忠.
    • 学会等名
      第15回細菌学若手コロッセウム
  • [学会発表] 肺炎球菌のニューモライシン依存的な鼻粘膜バリア傷害と脳への伝播機構の関連.2021

    • 著者名/発表者名
      高原悠樹,住友倫子,山口雅也,中田匡宣,川端重忠.
    • 学会等名
      第63回歯科基礎医学会学術大会
  • [学会発表] 細胞外マトリックスを用いた交互積層細胞コート法による三次元肺組織モデルの構築.2021

    • 著者名/発表者名
      赤松由佳子,住友倫子,川端重忠.
    • 学会等名
      第63回歯科基礎医学会学術大会
  • [学会発表] 化膿レンサ球菌の不活性型ヒアルロン酸分解酵素の結晶構造解析と活性型変異体の構造予測.2021

    • 著者名/発表者名
      東孝太郎,山口雅也,中田匡宣,武部克希,住友倫子,鈴木守,川端重忠.
    • 学会等名
      第63回歯科基礎医学会学術大会
  • [学会発表] 高速原子間力顕微鏡によるグラム陽性菌表層構造および自己融解酵素作用過程の解析.2021

    • 著者名/発表者名
      太田悠夢,山下隼人,東孝太郎,山口雅也,川端重忠,阿部真之.
    • 学会等名
      第73回日本細菌学会関西支部会
  • [学会発表] emm89型化膿レンサ球菌における侵襲性に相関する変異の探索と立体構造予測解析.2021

    • 著者名/発表者名
      大野誠之,山口雅也,広瀬雄二郎,東孝太郎,秋山徹,住友倫子,池辺忠義,川端重忠.
    • 学会等名
      第73回日本細菌学会関西支部会
  • [学会発表] K-mer関連解析を用いたemm89型化膿レンサ球菌による侵襲性感染症の発症機構の解明.2021

    • 著者名/発表者名
      大野誠之,山口雅也,広瀬雄二郎,東孝太郎,秋山徹,住友倫子,池辺忠義,山口貴弘,河原隆二,奥野ルミ,大塚仁,松本裕子,賀澤優,中西典子,秋山由美,中川力,川端重忠.
    • 学会等名
      第44回日本分子生物学会
  • [学会発表] Exploring pneumococcal virukence factors via molecular evolutionary analysis.2021

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi M.
    • 学会等名
      The 3rd Asian Pneumococcal Symposium
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Nasal epithelial barrier dysfunction involved in non-hematogenous pneumococcal dissemination to brain tissue.2021

    • 著者名/発表者名
      Takahara Y, Sumitomo T, Kono M, Yamaguchi M, Nakata M, Hotomi M, Kawabata S.
    • 学会等名
      The 3rd Asian Pneumococcal Symposium
    • 国際学会
  • [図書] 微生物,イラストでわかる歯科医学の基礎 第4版2021

    • 著者名/発表者名
      山口雅也,川端重忠.
    • 総ページ数
      13
    • 出版者
      永末書店
    • ISBN
      978-4-8160-1393-5
  • [図書] 感染,イラストでわかる歯科医学の基礎 第4版2021

    • 著者名/発表者名
      住友倫子,川端重忠.
    • 総ページ数
      6
    • 出版者
      永末書店
    • ISBN
      978-4-8160-1393-5
  • [図書] 口腔感染症,イラストでわかる歯科医学の基礎 第4版2021

    • 著者名/発表者名
      山口雅也,川端重忠.
    • 総ページ数
      7
    • 出版者
      永末書店
    • ISBN
      978-4-8160-1393-5
  • [図書] Role of BgaA as a pneumococcal virulence factor elucidated by molecular evolutionary analysis; Evolutionary Mechanisms of Infectious Diseases. In Evolutionary Mechanisms of Infectious Diseases.2021

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi M, Takemura M, Higashi K, Goto K, Hirose Y, Sumitomo T, Nakata M, Uzawa N, Kawabata S.
    • 総ページ数
      11
    • 出版者
      Frontiers Media SA
    • ISBN
      978-2-88966-985-1
  • [図書] 口腔微生物学・免疫学 第5版2021

    • 著者名/発表者名
      川端重忠,大原直也,小松澤均,寺尾豊
    • 総ページ数
      332
    • 出版者
      医歯薬出版
    • ISBN
      978-4-263-45866-2
  • [図書] 微生物の歴史と発展,口腔微生物学・免疫学 第5版2021

    • 著者名/発表者名
      川端重忠.
    • 総ページ数
      5
    • 出版者
      医歯薬出版
    • ISBN
      978-4-263-45866-2
  • [図書] 微生物の基礎,口腔微生物学・免疫学 第5版2021

    • 著者名/発表者名
      川端重忠.
    • 総ページ数
      3
    • 出版者
      医歯薬出版
    • ISBN
      978-4-263-45866-2
  • [図書] 真菌,口腔微生物学・免疫学 第5版2021

    • 著者名/発表者名
      住友倫子,川端重忠.
    • 総ページ数
      10
    • 出版者
      医歯薬出版
    • ISBN
      978-4-263-45866-2
  • [図書] 微生物の遺伝学,口腔微生物学・免疫学 第5版2021

    • 著者名/発表者名
      中田匡宣,川端重忠.
    • 総ページ数
      6
    • 出版者
      医歯薬出版
    • ISBN
      978-4-263-45866-2
  • [図書] グラム陽性球菌と感染症,口腔微生物学・免疫学 第5版2021

    • 著者名/発表者名
      山口雅也,川端重忠.
    • 総ページ数
      8
    • 出版者
      医歯薬出版
    • ISBN
      978-4-263-45866-2
  • [図書] Host-pathogen Interaction During Pneumococcal Infections.2021

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi M, Kinjo Y, Nizet V.
    • 総ページ数
      157
    • 出版者
      Frontiers Media SA
    • ISBN
      978-2-88971-888-7
  • [備考] 大阪大学 大学院歯学研究科 口腔細菌学教室

    • URL

      https://web.dent.osaka-u.ac.jp/mcrbio/

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公開日: 2022-12-28  

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