研究課題
骨髄系樹状細胞のエンドソームに局在するToll-1 ike receptor(TLR)3は、合成dsRNAのpoly(I:C)を認識し、炎症性サイトカインやIFN-α/β産生を誘導する。Poly(I:C)によるTLR3活性化には、Raftlin依存的エンドサイトーシスが必須である。一方、ウイルス感染時でのTLR3によるウイルス核酸認識の機構は不明である。本研究では、TLR3が認識するRNA構造を新たに同定した。感染細胞内に(+)鎖ssRNAとdsRNAが検出されるポリオウイルスのcDNAをテンプレートに500～1800bpの断片化された(+)鎖、(-)鎖のssRNA、それらのdsRNAをin vitro転写で作製し、TLR3活性化能をIFN-β promoterの活性化で調べた結果、dsRNA以外にある種のssRNA断片がTLR3を活性化することが明らかとなった。この機能性ssRNAは分解に抵抗性であり、ヒト繊維芽細胞や上皮系細胞、マウス骨髄系樹状細胞からIFN-α/β,炎症性サイトカイン産生をTLR3-TICAM-1依存的に誘導した。更に、poly(I:C)同様、Raftlin依存的に細胞内に取り込まれ初期エンドソームのTLR3と共局在する事、TLR3細胞外領域のN末、C末に存在するdsRNA結合領域を介してTLR3を多量体化させシグナルを伝達すること、dsRNA領域が活性化に必要であることが判明した。二次構造予測と生化学的解析から、機能性ssRNAは比較的長いタンデムなステム構造をもつことが明らかとなった。従ってウイルス感染時では、感染細胞から漏出したdsRNA、ssRNA断片が取り込みレセプターを介して取り込まれ、エンドソームのTLR3で感知されると考えられる。分解抵抗性のssRNA断片はネクローシス死細胞からも漏出すると考えられ、TLR3の炎症応答への関与を示唆するものである。
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Proc Natl Acad Sci USA
巻: 109 ページ: 2066-2071
10.1073/pnas.1113099109
J.Biochem.
巻: 151 ページ: 5-11
10.1093/jb/mvr111
J.Virol
巻: 86 ページ: 185-194
10.1128/JVI.05245-11
PLoS ONE
巻: 6 ページ: e28500
10.1371/journal.pone.0028500
巻: 6 ページ: e26836
10.1371/journal.pone.0026836
J.Immunol
巻: 187 ページ: 5320-5327
10.4049/jimmuno.1101503
Mol.Cell Biol
巻: 31 ページ: 3802-3819
10.1128/MCB.01368-10
Plos ONE
巻: 6 ページ: e21284
10.1371/journal.pone.0021284
