• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2009 年度 実績報告書

効率的かつ持続的発現が可能な遺伝子治療用DNAの核内動態制御システムの創製

研究課題

研究課題/領域番号 21300174
研究機関愛媛大学

研究代表者

紙谷 浩之  愛媛大学, 大学院・理工学研究科, 教授 (10204629)

研究分担者 秋田 英万  北海道大学, 大学院・薬学研究院, 准教授 (80344472)
キーワード非ウィルスベクター / 外来DNA / 遺伝子治療 / 核内動態
研究概要

1.ヒストン高親和性配列の導入:ヒストン高親和性配列(left-handedly curved配列)をプロモーター上流の様々な位置に導入したプラスミドDNA(ルシフェラーゼ遺伝子を含む)をトランスフェクションにより培養細胞に導入した。その結果、ヒストン高親和性配列の導入によりルシフェラーゼ遺伝子の発現が上昇した。また、プラスミドDNAをhydrodynamics法によりマウスへ投与したところ、同様にルシフェラーゼ遺伝子の発現が上昇した。
2.ヒストンとの結合を防ぐ配列の導入:ヒストンとの結合を防ぐ(ヌクレオソーム形成を抑制するA_<30>、(CG)_<15>配列)配列をプロモーター近傍に導入したプラスミドDNA(ルシフェラーゼ遺伝子を含む)をトランスフェクションにより培養細胞に導入した。その結果、ヒストンとの結合を防ぐ配列の導入によりルシフェラーゼ遺伝子の発現が上昇した。また、プラスミドDNAをhydrodynamics法によりマウスへ投与したところ、同様にルシフェラーゼ遺伝子の発現が上昇した。
3.転写因子をリクルートするためのシステム:基本転写因子をリクルートする蛋白質(ヘルペスウイルスVP16)と配列依存的DNA結合蛋白質(酵母GAL4)の融合蛋白質(activator)の遺伝子を作製しプラスミドに導入した。また、GAL4が結合する配列をルシフェラーゼ遺伝子とactivator遺伝子のプロモーター上流に導入した。トランスフェクションにより培養細胞に導入した結果、正のフィードバック機構によりactivator発現が持続し、ルシフェラーゼの発現も持続した。

  • 研究成果

    (5件)

すべて 2009

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (3件)

  • [雑誌論文] Effects of non-B DNA sequences on transgene expression2009

    • 著者名/発表者名
      H.Kamiya, H.Goto, H.Harashima
    • 雑誌名

      J.Biosci.Bioengng.

      巻: 108 ページ: 20-23

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Effects of carriers on transgene expression from plasmids containing a DNA sequence with high histone affinity2009

    • 著者名/発表者名
      H.Kamiya, S.Fukunaga, T.Ohyama, H.Harashima
    • 雑誌名

      Int.J.Pharm.

      巻: 376 ページ: 99-103

    • 査読あり
  • [学会発表] Two-step transcription amplificationを用いたin vivoにおける外来遺伝子発現活性化2009

    • 著者名/発表者名
      神田元紀, 落合浩史, 原島秀吉, 紙谷浩之
    • 学会等名
      第32回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      横浜
    • 年月日
      2009-12-10
  • [学会発表] 核内動態制御を可能とする遺伝子治療用DNAの創製2009

    • 著者名/発表者名
      紙谷浩之
    • 学会等名
      第3回次世代を担う若手医療薬科学シンポジウム
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2009-11-14
  • [学会発表] 外来遺伝子持続的発現システムの構築2009

    • 著者名/発表者名
      紙谷浩之, 落合浩史, 原島秀吉
    • 学会等名
      第25回日本DDS学会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2009-07-04

URL: 

公開日: 2012-07-19  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi