アルツハイマー認知症のワクチン分子設計に関する基礎研究

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21310144
• 研究機関: 鹿児島大学
• 研究代表者: 杉村 和久 鹿児島大学, 理工学研究科(工学系), 教授 (80127240)
• 研究分担者: 橋口 周平 鹿児島大学, 理工学研究科(工学系), 助教 (40295275)
• キーワード: アルツハイマー認知症 / M13ファージ / ワクチン / 自然免疫 / MyD88 / TLR9 / ヒト抗体 / ミミックペプチド

研究概要

予定していた項目は、
1)ヒト抗体の開発
2)B6抗体、B7抗体を用いて、J20の受動免疫実験
3)ワクチン設計を目指した免疫法の基礎研究
4)AβミミックペプチドがJ20の病態に及ぼす影響の検討
1)については一本鎖ヒト抗体であったB7を完全IgG型に変換し、HEK293細胞で発現、精製を達成した。
2)アルツハイマーモデルマウス、J20を繁殖させ、その遺伝子型をPCRにより確認し、実験を開始したが、実験可能な個体数の不足から、明解な回答は得られていない。再度実施する予定である。
3)免疫法の基礎研究では、M13ファージをリン酸緩衝液に溶かし、アジュバント無しで、腹腔、もしくは皮下に注射するだけで、非常に強い1次免疫応答が誘導され、しかもIgG抗体が産生される事を発見した。この免疫応答はMyD88シグナルに依存する自然免疫によることを遺伝子改変マウスを用い明らかにしたが、TLR2,4,5,7,9の関与と担当シグナル系は今後明らかにする必要がある。BBRCに速報で報告された。今後のワクチン開発に重要な知見をもたらした。
4)J20の個体数の不足により、進展していないが、B7抗体はアミロイド線維に結合する事、Aβミミックペプチド、B6-C15はプレフィブリルAβに結合する事より、脳内に蓄積するアミロイドプラークの組織染色解析を行った結果、市販のN-末を認識する抗体等とは異なる染色像が認められることより、脳内アミロイドの染め分けが出来る事が示唆された。この成績と病態の進行、その分子機序との関係が今後の解析目標となった。

研究成果

• [雑誌論文] ファージディスプレイとBeyond antibody :～抗体様分子による分子標的～ (2010)
  • 著者名/発表者名: 橋口周平、伊東祐二、田中孝一、松木園美穂、村岡賢、杉村和久
  • 雑誌名: 生化学 巻: 82 ページ: 710-726
• [雑誌論文] Immunological basis of M13 phage vaccine : Regulation under MyD88 and TLR9 signaling. (2010)
  • 著者名/発表者名: Shuhei Hashiguchi, Yuya Yamaguchi, Osamu Takeuchi, Shizuo Akira, Kazuhisa Sugimura
  • 雑誌名: BBRC 巻: 402 ページ: 19-22
  • 査読あり
• [雑誌論文] Characterization of Human Single-Chain Antibodies Against Highly Pathogenic Avian Influenza H5N1 Viruses : Mimotope and Neutralizing Activity. (2010)
  • 著者名/発表者名: JiuPian Yang, Reiko Yoshida, Yuji Ito, Yuki Kariya, Xu Zhang, Shuhei Hashiguchi, Toshihiro Nakashima, Yasuo Suda, Ayato Takada, Kazuhisa Sugimura.
  • 雑誌名: J.Biochem. 巻: 148 ページ: 504-515
  • 査読あり
• [雑誌論文] Contribution of IL-18 to eosinophilic airway inflammation induced by immunization and challenge with Staphyloccus aureus proteins. (2010)
  • 著者名/発表者名: May Kuroda-Morimoto, Hidehisa Tanaka, Nobuki Hayashi, Masakiyo Nakahira, Tasutomo Imai, Michiko Imamura, Koubun Yasuda, Shizue Yumikura-Futatsugi, Kiyoshi Matsui, Toshihiro Nakashima, Kazuhisa Sugimura, Hiroko Tsutsui, Hajime Sano, Keiji Nakanishi
  • 雑誌名: Int.Immunol. 巻: 22 ページ: 561-570
  • 査読あり
• [学会発表] Immunological basis of phage vaccine as an experimental model using Alzheimer's disease model mice, J20 immunized with a mimotope-phage clone selected by a fibrillar Abeta42-specific antibody. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yuya Yamaguchi, Shuhei Hashiguchi, Koichi Tanaka, Risa Abe, Kazuhisa Sugimura.
  • 学会等名: The Immunotherapeutics and vaccine summit
  • 発表場所: Cambridge, MA
  • 年月日: 20100817-20100819
• [学会発表] M13バクテリオファージ免疫におけるTLRファミリー分子の役割について (2010)
  • 著者名/発表者名: 田原春菜、橋口周平、山口雄也、竹内理、審良静男、杉村和久
  • 学会等名: BMB2010第33回日本分子生物学会年会・第83回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸市
  • 年月日: 2010-12-09
• [学会発表] Immunological basis of M13 phage vaccines : an effective vaccine design tested in a mouse model of Alzheimer's disease. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hashiguchi S, Yamaguchi Y, Tahara H, Yamada T, Kai S, Abe R, Tanaka K, Sugimura K.
  • 学会等名: 5th International Peptide Symposium
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2010-12-06
• [学会発表] Essential role of MyD88 in humoral response to M13 bacteriophage in mice and negative role of TLR9 in IgG1 response. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hashiguchi S, Yamaguchi Y, Takeuchi O, Akira S, Sugimura K.
  • 学会等名: 14th International Congress of Immunology
  • 発表場所: 神戸市
  • 年月日: 2010-08-24