魚類免疫応答におけるT細胞機能の解明による魚類疾病の診断・予防法の開発

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21380126
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 水産学一般
• 研究機関: 日本大学
• 研究代表者: 中西 照幸 日本大学, 生物資源科学部, 教授 (00322496)
• 研究分担者: 杣本 智軌 九州大学, 農学研究科, 准教授 (40403993) ; 荒木 亨介 鹿児島大学, 水産学部, 助教 (30409073) ; 中易 千早 水産総合研究センター, 養殖研究所, 研究員 (00311225)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• キーワード: 魚類 / T細胞 / 細胞性免疫 / ギンブナ / CD4 / CD8 / IFNγ

研究概要

モノクローナル抗体を用い、ギンブナにおけるT細胞サブセットの分布およびヘルパーT細胞の特性を明らかにした。細胞障害性T細胞の細胞傷害機構および抗原刺激に伴うT細胞の分化・成熟機構を明らかにした。細胞内寄生細菌に対する感染防御において細胞性免疫が主要な役割を果たしていること、ならびにサイトカインによる細胞性免疫の誘導のための基盤技術を開発した。ヒラメやブリにおける細胞性免疫研究手法を開発した。

研究成果

• [雑誌論文] Antiviral protection mechanisms mediated by ginbuna crucian carp interferon gamma isoforms 1 and 2 through two distinct interferon gamma receptors (2011)
  • 著者名/発表者名: Yabu, T., H. Toda, Y. Shibasaki, K. Araki, T. Nakanishi, 他7名
  • 雑誌名: J. Biochem 巻: 150(6) ページ: 635-48
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cytotoxic T cells in teleost fish (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakanishi T, H. Toda, Y. Shibasaki, T. Somamoto
  • 雑誌名: Dev Comp Immunol 巻: 35 ページ: 1317-1323
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular characterization of MHC class I and beta-2 microglobulin in a clonal strain of ginbuna crucian carp, Carassius auratus langsdorfii (2011)
  • 著者名/発表者名: Urabe S, Somamoto T, Sameshima S, Unoki-Kato Y, T. Nakanishi, Nakao M
  • 雑誌名: Fish Shellfish Immunol 巻: 31(3) ページ: 469-74
  • 査読あり
• [雑誌論文] Suppression subtractive hybridization coupled with microarray analysis to examine differential expression of genes in Japanese flounder Paralichthys olivaceus leukocytes during Edwardsiella tarda and viral hemorrhagic septicemia virus infection (2011)
  • 著者名/発表者名: Matsuyama T, Fujiwara A, Takano T, Nakayasu C
  • 雑誌名: Fish and shellfish immunology 巻: 31(4) ページ: 524-32
  • 査読あり
• [雑誌論文] The expression of CD8alpha discriminates distinct T cell subsets in teleost fish (2011)
  • 著者名/発表者名: Takizawa, F., Dijkstra, J. M., T. Nakanishi., Fischer, U., 他5名
  • 雑誌名: Dev Comp Immunol 巻: 35(7) ページ: 752-763
  • 査読あり
• [雑誌論文] Conservation of characteristics and functions of CD4 positive lymphocytes in a teleost fish (2011)
  • 著者名/発表者名: Toda H., Y. Saito, K. Araki, T. Yabu, T. Somamoto, T. Nakanishi, 他6名
  • 雑誌名: Dev Comp Immunol 巻: 35(6) ページ: 650-660
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluating antigenspecific cytotoxicity of CD8+T cells in fish by Granzyme B-like activity (2011)
  • 著者名/発表者名: Toda H., T. Yabu, H. Shiba, T. Moritomo and T. Nakanishi
  • 雑誌名: Vet Immunol Immunopathol 巻: 141 ページ: 168-172
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clonal growth of carp(Cyprinus carpio) T cells in vitro (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi T, Katakura F, T. Yabu, T. Nakanishi, 他6名
  • 雑誌名: Dev Comp Immunol 巻: 35(2) ページ: 193-202
  • 査読あり
• [雑誌論文] Perforin-dependent cytotoxic mechanism in killing by CD8 positive T cells in Ginbuna crucian carp, Carassius auratus langsdorfii (2011)
  • 著者名/発表者名: Toda H, Araki K, Moritomo T, T. Nakanishi
  • 雑誌名: Dev Comp Immunol 巻: 35(1) ページ: 88-93
  • 査読あり
• [雑誌論文] Constitutive high expression of interleukin 4/13A and GATA-3 in gill and skin of salmonid fishes suggests that these tissues form Th2-skewed immune environments (2011)
  • 著者名/発表者名: Takizawa, F., E. O. Koppang, M. Ohtani, T. Nakanishi, K. Hashimoto, U. Fischer J. M. Dijkstra.
  • 雑誌名: Mol. Immunol 巻: 48(12-13) ページ: 1360-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dijkstra A molecule in teleost fish, related with human MHC-encoded G6F, has a cytoplasmic tail with ITAM and marks the surface of thrombocytes and in some fishes also of erythrocytes (2010)
  • 著者名/発表者名: Ohashi K., F. Takizawa, N. Tokumaru, C. Nakayasu, H. Toda, U. Fischer, T. Moritomo1, K. Hashimoto, T. Nakanishi, J. M.
  • 雑誌名: Immunogenetics 巻: 62(8) ページ: 543-59
  • 査読あり
• [雑誌論文] Kinetics of CD4+ and CD8α+ T-cell subsets in Graft-Versus-Host Reaction(GVHR) in ginbuna crucian carp Carassius auratus langsdorfii (2010)
  • 著者名/発表者名: Shibasaki Y., H. Toda, I. Kobayashi, T. Moritomo and T. Nakanishi
  • 雑誌名: Dev Comp Immunol 巻: 34 ページ: 1075-1081
  • 査読あり
• [雑誌論文] Zin-cdependent binding between peptides derived from rainbow trout CD8alpha and LCK (2010)
  • 著者名/発表者名: Hayashi N, Takeuchi M, T. Nakanishi, Hashimoto K, Dijkstra JM
  • 雑誌名: Fish Shellfish Immunol 巻: 26(1) ページ: 72-76
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparative gene expression analysis of zebrafish and mammals identifies common regulators in hematopoietic stem cells (2010)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi I, Ono H, Moritomo T, Kano K, T. Nakanishi, Suda T
  • 雑誌名: Blood 巻: 115(2) ページ: e1-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lymphocytes with T-cell-like properties express the Fas ligand in the Japanese flounder Paralichthys olivaceus (2010)
  • 著者名/発表者名: Kurata O, Iwasaki T, Matsuyama T, Nakayasu C, Wada S, Hatai K
  • 雑誌名: Fish Shellfish Immunol 巻: 30(2) ページ: 509-14
  • 査読あり
• [雑誌論文] The efficacy of five avirulent Edwardsiella tarda strains in a live vaccine against Edwardsiellosis in Japanese flounder, Paralichthys olivaceus (2010)
  • 著者名/発表者名: Takano T, Matsuyama T, Oseko N, Sakai T, Kamaishi T, Nakayasu C, Sano M, Iida T
  • 雑誌名: Fish Shellfish Immunol 巻: 29 ページ: 687-693
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immunocytochemical studies of the ontogeny of peripheral blood leucocyte subpopulations in Japanese flounder(Paralichthys olivaceus) (2010)
  • 著者名/発表者名: Matsuyama T, Nakayasu C, Sano M
  • 雑誌名: Fish and shellfish immunology 巻: 29(2) ページ: 362-365
  • 査読あり
• [雑誌論文] Detection of Japanese flounder antibody against fimbrial major protein of Edwardsiella tarda (2010)
  • 著者名/発表者名: Sakai T, Matsuyama T, Nakayasu C
  • 雑誌名: Fish Pathology 巻: 46(1) ページ: 23-25
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vitro generation of viral-antigen dependent cytotoxic T-cells from ginbuna crucian carp, Carassius auratus langsdorfii (2009)
  • 著者名/発表者名: Somamoto, T., N. Okamoto, T. Nakanishi, M. Ototake, and M. i Nakao.
  • 雑誌名: Virology 巻: 389(1-2) ページ: 26-33
  • 査読あり
• [雑誌論文] Allo-antigen specific killing is mediated by CD8 positive T cells in fish (2009)
  • 著者名/発表者名: Toda H., Y. Shibasaki, T. Koike, M. Ohtani, F. Takizawa, M. Ototake, T. Moritomo and T. Nakanishi
  • 雑誌名: Dev. Comp. Immunol 巻: 33 ページ: 646-652
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cytokine-expression profiles of intestinal epithelial cells(IEC) in rainbow trout, Oncorhynchus mykiss, against bacterial and viral infection (2009)
  • 著者名/発表者名: Komatsu K, Tsutsui S, Araki K, Nakamura O, Watanabe T.
  • 雑誌名: Dev Comp Immunol 巻: 33 ページ: 499-506
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of major antigenic proteins of Edwardsiella tarda recognized by Japanese flounder antibody (2009)
  • 著者名/発表者名: Sakai T, Matsuyama T, Nishioka T, Nakayasu C, Kamaishi T, Yamaguchi K, Iida T
  • 雑誌名: J. Vet. Diagn. Invest 巻: 21 ページ: 504-509
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular cloning and expression analysis of interferon gamma gene in Japanese flounder(Paralichthys olivaceus) (2009)
  • 著者名/発表者名: Matsuyama T, Fujiwara A, Sakai T and Nakayasu C
  • 雑誌名: Fisheries Science 巻: 75 ページ: 751-756
  • 査読あり
• [学会発表] コイTh2様細胞のクローン性増殖 (2012)
  • 著者名/発表者名: 山口卓哉、片倉文彦、森友忠昭、中西照幸
  • 学会等名: 日本水産学会春季大会
  • 発表場所: 東京海洋大学
  • 年月日: 2012-03-29
• [学会発表] コイIL-4/13BのB細胞培養に対する効果 (2012)
  • 著者名/発表者名: 宮田俊輔・山口卓哉・片倉文彦・柴崎康宏・藪健史・森友忠昭・中西照幸
  • 学会等名: 日本水産学会春季大会
  • 発表場所: 東京海洋大学
  • 年月日: 2012-03-29
• [学会発表] 魚類の細胞性免疫機構について (2012)
  • 著者名/発表者名: 中西照幸・柴崎康宏・藪健史・杣本智軌
  • 学会等名: 第153回獣医学会微生物分科会シンポジウム
  • 発表場所: 大宮ソニックシティ
  • 年月日: 2012-03-27
• [学会発表] Characterization of interferon gamma structurally related(IFNγrel) isoform 1 and 2 in ginbuna crucian carp, Carassius auratus langsdorfii (2011)
  • 著者名/発表者名: Shibasaki, Y., T. Yabu, T. Moritomo, and T. Nakanishi
  • 学会等名: The Second Comparative Immunology & Pathology Workshop(CIPW)
  • 発表場所: Edmonton, Canada
  • 年月日: 20110524-27
• [学会発表] ギンブナのEdwardsiella tardaに対する感染防御における感作CTL移入効果の検討 (2011)
  • 著者名/発表者名: 山崎雅俊・荒木亨介・中西照幸・中易千早・山本淳
  • 学会等名: 日本魚病学会秋季大会
  • 発表場所: 長崎大学
  • 年月日: 2011-10-02
• [学会発表] ギンブナアロ鱗移植部位におけるTリンパ球サブセットの活性化と動態 (2011)
  • 著者名/発表者名: 西野達之・戸田秀明・柴崎康宏・藪健史・森友忠昭、中西照幸
  • 学会等名: 日本水産学会秋季大会
  • 発表場所: 長崎大学
  • 年月日: 2011-10-01
• [学会発表] 魚類特有のインターフェロン、IFNγrel 1, IFNγrel 2の同定 (2011)
  • 著者名/発表者名: 柴崎康宏, 藪健史, 間野伸宏, 司馬肇, 森友忠昭, 中西照幸
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都国際会館
  • 年月日: 2011-09-22
• [学会発表] ギンブナCD3ε分子の特性解明 (2011)
  • 著者名/発表者名: 村田憲史、大橋健、柴崎康宏, 藪健史, 森友忠昭、中西照幸
  • 学会等名: 日本比較免疫学会第23回学術集会、海洋研究開発機構
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2011-08-21
• [学会発表] ギンブナの移植片対宿主反応におけるCD8陽性T細胞の動態日本比較免疫学会 (2011)
  • 著者名/発表者名: 田中洋枝、柴崎康宏、藪健史、森友忠昭、中西照幸
  • 学会等名: 第23回学術集会、海洋研究開発機構
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2011-08-21
• [学会発表] In vitroにおけるコイCD4+T細胞のクローン性増殖生体防御学会 (2011)
  • 著者名/発表者名: 山口卓哉、片倉文彦、森友忠昭、中西照幸
  • 学会等名: 第22回学術集会
  • 発表場所: 琉球大学沖縄
  • 年月日: 2011-06-29
• [学会発表] Yabu Diversified isotypes of immune-related genes in teleost 8th Int (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakanishi, T., Y. Shibasaki, T.
  • 学会等名: Congress of Comp. Physiol. Biochem., Symposium on Evolution and diversity of innate and adaptive immune systems
  • 発表場所: Nagoya
  • 年月日: 2011-06-03
• [学会発表] Role of fish IFNγ-related gene (2011)
  • 著者名/発表者名: Shibasaki, Y., T. Yabu, T. Moritomo, T. Nakanishi
  • 学会等名: Immune system 2011 ASBMB Annual meeting
  • 発表場所: Washington DC, USA
  • 年月日: 2011-04-11
• [学会発表] Conserved Perforin/granzyme. mediated cytolytic mechanism in killing by CD8 positive T cells in teleost (2010)
  • 著者名/発表者名: Toda H., K. Araki, T. Moritomo, T. Nakanishi
  • 学会等名: 9th International Veterinary Immunology Symposium(9th IVIS)
  • 発表場所: Funabori Tower hall
  • 年月日: 2010-08-17
• [学会発表] ギンブナにおけるCD4, CD8陽性T細胞サブセットの組織分布 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小川詩乃、戸田秀明、柴崎康宏、森友忠昭、中西照幸
  • 学会等名: 日本比較免疫学会第22回学術集会
  • 発表場所: 九州大学
  • 年月日: 2010-08-03
• [学会発表] コイ末梢血白血球の培養におけるBリンパ球の増殖 (2010)
  • 著者名/発表者名: 仁井田祥光, 片倉文彦, 山口卓哉, 森友忠昭, 中西照幸
  • 学会等名: 日本比較免疫学会第22回学術集会
  • 発表場所: 九州大学
  • 年月日: 2010-08-03
• [学会発表] ウイルス感染で誘導されたギンブナ細胞傷害T細胞と単球の細胞傷害活性 (2010)
  • 著者名/発表者名: 杣本智軌、中西照幸、中尾実樹
  • 学会等名: 日本比較免疫学会第22回学術集会
  • 発表場所: 九州大学
  • 年月日: 2010-08-03
• [学会発表] Role of interferon gamma signaling in teleosts (2010)
  • 著者名/発表者名: Yabu T. and T. Nakanishi
  • 学会等名: 9th International Congress on the Biology of Fish
  • 発表場所: Barcelona
  • 年月日: 2010-07-06
• [学会発表] Phenotypic differences between non-mucosal and mucosal CD8+T-cells in rainbow trout(Oncorhynchus mykiss) (2010)
  • 著者名/発表者名: Takizawa F., Dijkstra J. M., Kotterba P., Kollner B., Nakanishi T., Fischer U.
  • 学会等名: European Organisation of Fish Immunology
  • 発表場所: Viterbo, Italy
  • 年月日: 2010-05-23
• [学会発表] コイ成熟T細胞のin vitroにおける増殖 (2010)
  • 著者名/発表者名: 山口卓哉・四反田聡・片倉文彦・大谷真紀・末武弘章・森友忠昭・中西照幸
  • 学会等名: 平成22年度日本水産学会春季大会
  • 発表場所: 日本大学生物資源科学部
  • 年月日: 2010-03-28
• [学会発表] コイ造血細胞の培養-増殖したT細胞のクローン性と分化段階の解析- (2009)
  • 著者名/発表者名: 山口卓哉、片倉文彦、四反田聡、吉田美幸、森友忠昭、中西照幸
  • 学会等名: 第21回日本比較免疫学会
  • 発表場所: 日本大学生物資源科学部
  • 年月日: 2009-08-04
• [学会発表] 混合リンパ球培養におけるTリンパ球サブセットの動態および免疫関連遺伝子発現の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 戸田秀明、乙竹充、森友忠昭、中西照幸
  • 学会等名: 第21回日本比較免疫学会
  • 発表場所: 日本大学生物資源科学部
  • 年月日: 2009-08-03
• [学会発表] 魚類赤血球及び栓球におけるITAMを有するCD4様分子の存在 (2009)
  • 著者名/発表者名: 大橋健、J. M. Dijkstra、瀧沢文雄、中易千早、森友忠昭、中西照幸
  • 学会等名: 第21回日本比較免疫学会
  • 発表場所: 日本大学生物資源科学部
  • 年月日: 2009-08-03
• [学会発表] ギンブナのアロ鱗移植部位におけるTリンパ球サブセットの動態 (2009)
  • 著者名/発表者名: 今林望、戸田秀明、乙竹充、森友忠昭、中西照幸
  • 学会等名: 第21回日本比較免疫学会
  • 発表場所: 日本大学生物資源科学部
  • 年月日: 2009-08-03
• [学会発表] Kinetics of CD4+and CD8+T-cell subsets in graft-versus-host reaction(GVHR) in ginbuna crucian carp Carassius auratus langsdorfii (2009)
  • 著者名/発表者名: Nakanishi T., Y. Shibazaki, I. Kobayashi, H. Toda, T. Moritomo
  • 学会等名: 11th Congress of Int. Soc. of Dev. and Comp. Immunol.
  • 発表場所: プラハ(チェコ)
  • 年月日: 2009-06-30
• [学会発表] Expression analysis of immune genes in ginbuna, Carassius auratus langsdorfii upon vaccination with Aeromonas hydrophila (2009)
  • 著者名/発表者名: Ohtani M., H. Toda, T. Moritomo and T. Nakanishi
  • 学会等名: 11th Congress of Int. Soc. of Dev. and Comp. Immunol
  • 発表場所: プラハ(チェコ)
  • 年月日: 2009-06-30
• [学会発表] Perforin-dependent cytotoxic mechanisms of CD8 positive t cells in ginbuna crucian carp (2009)
  • 著者名/発表者名: Toda H., M. Ototake, T. Moritomo and T. Nakanishi
  • 学会等名: 11th Congress of Int. Soc. of Dev. and Comp. Immunol
  • 発表場所: プラハ(チェコ)
  • 年月日: 2009-06-30
• [学会発表] Development of the single-cell colonyforming assay system : characterization of carp(Cyprinus carpio) kidney hematopoietic progenitor cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Katakura F., M. Yoshida, T. Yamaguchi, T. Moritomo, and T. Nakanishi
  • 学会等名: 11th Congress of Int. Soc. of Dev. and Comp. Immunol.
  • 発表場所: プラハ(共和国)
  • 年月日: 2009-06-30
• [学会発表] Long-term proliferation of common carp(Cyprinus carpio) CD4+αβT-cells in culture (2009)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi T., F. Katakura, M. Yoshida, M. Otani, T. Moritomo and T. Nakanishi
  • 学会等名: 11th Congress of Int. Soc. of Dev. and Comp. Immunol.
  • 発表場所: プラハ(チェコ)
  • 年月日: 2009-06-30
• [学会発表] Characterization of MHC class I genes in clonal ginbuna crucian carp, Carassius auratus langsdorfii (2009)
  • 著者名/発表者名: Urabe S., T. Somamoto, S. Sameshima, T. Nakanishi, M. Ototake and M. Nakao
  • 学会等名: 11th Congress of Int. Soc. of Dev. and Comp. Immunol
  • 発表場所: プラハ(チェコ)
  • 年月日: 2009-06-30
• [学会発表] Role of interferon-gamma and perforin on the cell-mediated immunity in fish (2009)
  • 著者名/発表者名: Araki K., F. Takizawa, M. Yamasaki, M. Esumi, M. Konishi, A. Yamamoto, T. Moritomo, M. Ototake, T. Nakanishi
  • 学会等名: 11th Congress of Int. Soc. of Dev. and Comp. Immunol.
  • 発表場所: プラハ(チェコ)
  • 年月日: 2009-06-30
• [学会発表] 魚類における細胞傷害性Tリンパ球(CTL)の同定及び機能について (2009)
  • 著者名/発表者名: 中西照幸
  • 学会等名: 第12回マリンバイオテクノロジー学会
  • 発表場所: 早稲田大学
  • 年月日: 2009-05-31
• [図書] 水産用ワクチンハンドブック (2009)
  • 著者名/発表者名: 中西照幸・乙竹充
  • 総ページ数: 130
  • 出版者: 恒星社厚生閣