ヘルペスウイルスの非自然宿主における致死性病原性発現機構の解明

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21380179
• 研究機関: 岐阜大学
• 研究代表者: 福士 秀人 岐阜大学, 応用生物科学部, 教授 (10156763)
• 研究分担者: 大屋 賢司 岐阜大学, 応用生物科学部, 准教授 (50402219)
• キーワード: ヘルペスウイルス / 神経病原性

研究概要

本研究の目的は,ヘルペスウイルスが非自然宿主に致死性脳炎を引き起こすメカニズムを分子レベルで解明することである.すなわち,ウマ属を自然宿主とするウマヘルペスウイルス1型(EHV-1)および9型(EHV-9)を対象とし,非自然宿主であるマウスにおけるウマヘルペスウイルスによる致死性脳炎の発現メカニズムを分子動態として明らかにすることである.今年度はEHV-1を用いORF38およびORF63の組み換え体およびEHV-9のmRNA発現を解析した.ORF38はチミジンキナーゼをコードしているが,ORF37のプロモーター配列を含んでいる可能性があった.以前の研究からORF37の欠損は神経病原性の低下をもたらすことが判明している.そのため,ORF38欠損のウイルス増殖への影響はORF37発現の低下による可能性があった.ORF38欠損ウイルス感染細胞からORF37mRNAが検出され,ORF38欠損はORF37mRNA発現に殆ど影響しないことが分かった.逆に,ORF37欠損がORF38発現に与える影響をみたところ,同様にORF37欠損はORF38発現に影響しないことがわかった.次いで,神経病原性株Ab4pと非神経病原性株00c19で1アミノ酸が異なるEICPO(ORF63)に着目し,00c19由来EICPOを保有するAb4p(EICPOA416V)を作製した.Ab4p(EICPOA416V)は培養細胞における増殖はAb4p株と同様であったが,マウスでの神経病原性が消失していた.ウイルス感染細胞における網羅的mRNA解析として,次世代シーケンサーを用いた深部塩基配列解読を行った.mRNAの極性を反映させた塩基配列解読によりウイルス由来mRNAのコピー数を定量的に解析できることがわかった.

研究成果

• [雑誌論文] Effects of equine herpesvirus-9 infection in pregnant mice and hamsters (2011)
  • 著者名/発表者名: El-Habashi N, El-Nahass E, Fukushi H, Nayel M, Hibi D, Sakai H, Yanai T
  • 雑誌名: J.Comp.Pathol 巻: 144 ページ: 103-112
  • 査読あり
• [雑誌論文] Diverse pathogenicity of equine herpesvirus 1 (EHV-1) isolates in CBA mouse model. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yu MH, Kasem SG, Tsujimura K, Matsumura T, Yanai T, Yamaguchi T, Ohya K, Fukushi H.
  • 雑誌名: J.Vet.Med.Sci. 巻: 72 ページ: 301-306
  • 査読あり
• [雑誌論文] The ORF37 (UL24) is a neuropathogenicity determinant of equine herpesvirus 1 (EHV-1) in the mouse encephalitis model (2010)
  • 著者名/発表者名: Kasem S, Yu MH, Yamada S, Kodaira A, Matsumura T, Tsujimura K, Madbouly H, Yamaguchi T, Ohya K, Fukushi H.
  • 雑誌名: Virology 巻: 400 ページ: 259-270
  • 査読あり
• [雑誌論文] Experimental infranasal infection of equine herpesvirus 9 (EHV-9) in suckling hamsters : kinetics of viral transmission and inflammation in the nasal cavity and brain. (2010)
  • 著者名/発表者名: El-Habashi N, El-Nahass el-S, Fukushi H, Hibi D, Sakai H, Sasseville V, Yanai T.
  • 雑誌名: J.Neurovirol. 巻: 16 ページ: 242-248
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cynomolgus monkeys (Macaca fascicularis) may not become infected with equine herpesvirus 9 (2010)
  • 著者名/発表者名: Kodama A, Yanai T, Kubo M, El-Habashi N, Kasem S, Sakai H, Masegi T, Fukushi, H, Kuraishi T, Yoneda M, Hattori S, Kai C.
  • 雑誌名: J.Med.Primatol. 巻: 40 ページ: 18-20
  • 査読あり
• [学会発表] Affection of Equine Herpesvirus 9 (EHV-9) in pregnant rats (2010)
  • 著者名/発表者名: El-HabashiNagwan, El-Nahass El Shymaa, Mohamed Nayel,福士秀人, 酒井洋樹, 柳井徳磨
  • 学会等名: 日本獣医学会学術集会第150回
  • 発表場所: 帯広畜産大学
  • 年月日: 2010-09-17
• [学会発表] In vivo and in virto Characterization of Equine herpesvirus-1 thymidine kinase-deficient mutants (2010)
  • 著者名/発表者名: KasemSamy, YuMi Htay Htay,大屋賢司,福士秀人
  • 学会等名: 日本獣医学会学術集会第150回
  • 発表場所: 帯広畜産大学
  • 年月日: 2010-09-16
• [学会発表] 蛍光蛋白質融合テグメントVP22保有ウマヘルペスウイルス1型感染細胞におけるVP22動態のリアルタイム解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 羽入さち子,小平彩里,山田壮一, Samy, Kasem, Mi Htay Htay Yu,大屋賢司,福士秀人
  • 学会等名: 日本獣医学会学術集会第150回
  • 発表場所: 帯広畜産大学
  • 年月日: 2010-09-16
• [学会発表] ウマヘルペスウイルス増殖に優れたウマ胎仔脳由来細胞株の樹立 (2010)
  • 著者名/発表者名: 岡田彩加, Samy Kasem,辻村行司,松村富夫,大屋賢司,福士秀人
  • 学会等名: 日本獣医学会学術集会第150回
  • 発表場所: 帯広畜産大学
  • 年月日: 2010-09-16
• [学会発表] Functional characterization of ORF 13 of EHV-1 (2010)
  • 著者名/発表者名: YuMi Htay Htay, 吉崎範夫, KasemSamy, 大屋賢司, 福士秀人
  • 学会等名: 日本獣医学会学術集会第150回
  • 発表場所: 帯広畜産大学
  • 年月日: 2010-09-16