C型肝炎ウイルスの感染様式の解析と感染指示細胞株の樹立

2011 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21390138
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 松浦 善治 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (50157252)
• キーワード: HCV / 感染 / 指示細胞 / リポーター

研究概要

C型肝炎ウイルス(HCV)の研究に必須なin vitro培養系としては、実験室株である遺伝子型2aのJFH1株(HCVcc)と、ヒト肝癌由来細胞株であるHuh7細胞の組み合わせに限定されている。HCVの感受性細胞株が一つだけでは、ウイルス感染によって惹起される宿主遺伝子の変動を正確に解析するのは難しい。従って、比較対照となるHCVの感染性細胞株が必要である。近年、HCVの複製に肝臓細胞に特異的に発現しているmicroRNA-122(miR-122)が重要であることが明らかになってきた。実際、このmiR-122を過剰発現すれば、HCVのレプリコンを様々な細胞で樹立できることが報告されている。そこで今回、miR-122を過剰発現させることで、HCVccに感受性を示す新しいヒト肝細胞株の樹立を試みた。レンチウイルスベクターを用いてmiR-122を種々のヒト肝臓由来細胞株に導入し、HCVの感受性を検討した。調べたヒト肝細胞株の中で、miR-122を発現させたHep3B細胞(Hep3B/miR-122)にHCVの実験室株を感染させると、Huh7細胞と同等のゲノム複製と粒子産生能を示した。また、Hgp3B/miR-122細胞でHCVレプリコンが樹立可能で、さらに薬剤でウイルスゲノムを排除させた"Cured細胞"は、ウイルスの増殖効率が上昇していた。

研究成果

• [雑誌論文] Establishment of a novel permissive cell line for propagation of hepatitis Cvirus by the expression of microRNA122 (2012)
  • 著者名/発表者名: Kambara H
  • 雑誌名: J.Virol. 巻: 86 ページ: 1382-1393
  • 査読あり
• [雑誌論文] Elimination of hepatitis C virus from hepatocytes by a selective activation of therapeutic molecules (2011)
  • 著者名/発表者名: Wen X., Abe T., Kukihara H., Taguwa S., Mori Y., Tani H., Kato N., Suzuki T., Tatsumi M., Moriishi M., and Matsuura Y.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 6 ページ: e15967
  • DOI: doi:10.1371/journal.pone.0015967
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dysfunction of autophagy participates in vacuole formation and cell death in cells replicating hepatitis C virus (2011)
  • 著者名/発表者名: Taguwa S
  • 雑誌名: J.Virol. 巻: 85 ページ: 13185-13194
  • 査読あり
• [雑誌論文] Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2 participates in the replication of Japanese encephalitis virus through an interaction with viral proteins and RNA (2011)
  • 著者名/発表者名: Katoh H
  • 雑誌名: J.Virol. 巻: 85 ページ: 10976-10988
  • 査読あり
• [雑誌論文] Intracellular delivery of serum-derived hepatitis C virus (2011)
  • 著者名/発表者名: Fukuhara T
  • 雑誌名: Microbes Infect. 巻: 13 ページ: 405-412
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structure of hepatitis E viral particle (2011)
  • 著者名/発表者名: Mori Y, Matsuura Y
  • 雑誌名: Virus Res. 巻: 61 ページ: 59-64
  • 査読あり
• [学会発表] Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2 participates in the replication of Japanese encephalitis virus through the interaction with viral proteins and RNA (2011)
  • 著者名/発表者名: Katoh H, Mori Y, Kambara H, Kamitani W, and Matsuura Y.
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20111213-16
• [学会発表] miR122 participates in the determination of cell tropism of hepatitis C virus (2011)
  • 著者名/発表者名: Fukuhara T, Kambara H, Shiokawa M, Ohara Y, Ono C, and Matsuura Y.
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20111213-16
• [学会発表] miR122 facilitates replication of hepatitis C virus in non-hepatic cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Fukuhara T, Shiokawa M, Ninomiya A, Kambara H, Katoh H, Morita E, Wataru Kamitani W, and Matsuura Y.
  • 学会等名: 第59回日本ウイルス学会総会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20110912-16
• [学会発表] Annexins negatively regulate HCV RNA replication (2011)
  • 著者名/発表者名: Abe T
  • 学会等名: 18th International Meeting on HCV and Related Viruses
  • 発表場所: Seattle(アメリカ)
  • 年月日: 2011-09-10
• [学会発表] miR122 facilitates replication of hepatitis C virus in non-hepatic cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Fukuhara T
  • 学会等名: 18th International Meeting on HCV and Related Viruses
  • 発表場所: Seattle(アメリカ)
  • 年月日: 2011-09-10
• [学会発表] C型肝炎ウイルスの増殖と病原性発現に関与する宿主因子～細胞内蛋白質分解システムの関与について～ (2011)
  • 著者名/発表者名: 松浦善治
  • 学会等名: 第10回Hepatitis Expert Meeting
  • 発表場所: 東京(招待講演)
  • 年月日: 2011-08-27
• [学会発表] C型肝炎ウイルスの増殖と病原性に関与する宿主因子 (2011)
  • 著者名/発表者名: 松浦善治
  • 学会等名: 第48回日本ウイルス学会九州支部総会
  • 発表場所: 門司(招待講演)
  • 年月日: 2011-08-26
• [学会発表] Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2 participates in the replication of Japanese encephalitis virus through the interaction with viral proteins and RNA (2011)
  • 著者名/発表者名: Katoh H
  • 学会等名: The American Society for Wology 30th Annual Meeting
  • 発表場所: University of Minnesota, Minnesota(アメリカ)
  • 年月日: 2011-07-16
• [学会発表] miR122 facilitates replication of hepatitis C virus in non-hepatic cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Fukuhara T
  • 学会等名: The American Society for Virology 30th Annual Meeting
  • 発表場所: University of Minnesota, Minnesota(アメリカ)
  • 年月日: 2011-07-16
• [学会発表] C型肝炎・肝癌制圧の分子基盤 (2011)
  • 著者名/発表者名: 松浦善治
  • 学会等名: 第47回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 東京(招待講演)
  • 年月日: 2011-06-02
• [備考]
  • URL: http://www.biken.osaka-u.ac.jp/publications_j.html