iPS細胞と点変異修復技術を融合させたアミロイドニューロパチーの肝細胞置換療法

2011 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21390270
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 安東 由喜雄 熊本大学, 生命科学研究部, 教授 (20253742)
• 研究分担者: 城野 博史 熊本大学, 生命科学研究部, 講師 (40515483) ; 植田 光晴 熊本大学, 生命科学研究部, 助教 (60452885) ; 粂 昭苑 熊本大学, 発生医学研究所, 教授 (70347011)
• キーワード: iPS細胞 / アミロイドーシス / FAP / トランスサイレチン / 遺伝子治療 / 肝細胞 / 線維芽細胞

研究概要

家族性アミロイドポリニューロパチー(FAP)では、肝移植が現在唯一の治療手段となっているが、これにはいくつかの問題点がある。そこでFAP患者(FAP ATTR V30M, ATTR Y114C)の皮膚から採取した線維芽細胞をiPS細胞化し、FAPの肝細胞置換療法の可能性の検討ならびに細胞レベルでFAPの病態解析を行った。本年の研究結果から、FAP患者から樹立したiPS細胞は、健常人由来のiPS細胞と同様の肝細胞分化パターンを示すことが明らかとなり、本細胞が肝細胞への分化能を有していることが判明した。また、肝細胞の分化過程において、既知の肝細胞マーカー(アルブミンなど)の発現に比べTTRの発現はごく早期から認められ、肝細胞への分化後、異型TTRがmRNAレベルで発現していることが確認された。本細胞はヘテロ接合体のFAP患者から採取した細胞であるため、これをアテロコラーゲンで包埋したsingle stranded oligonucleotides (SSOs)で遺伝子変換を行ったところ、低率ながらも遺伝子変換が認められ、iPS細胞の安定培養法の確立後、SSOsおよびsiRNA TTRなどの核酸を対象に様々な遺伝子導入法を用いた導入効率の改善を行った。さらに、マウスを用いたiPS細胞の移植実験を行い、細胞数は少ないながらも肝臓への生着が確認できた。本年度の結果から、FAP患者由来のiPS細胞を安定的に肝細胞に分化させることが可能となり、遺伝子変換および細胞置換も低率ながら可能になったことから、これらの系を用いて、肝細胞置換療法に向けて、確かな展望が開ける状況が得られた。今後は、本細胞を用いた異型TTRの細胞内挙動・アミロイド形成能の解析と共に(これまでの異型TTRの高発現細胞株はホモの異型TTRを産生する細胞であるため、ヘテロ接合体のFAP患者から採取した本細胞は実際の患者で起こるアミロイド形成機構を解析するツールとして価値がある)、遺伝子変換効率の向上、我々が開発したトランスジェニックラットを用いたin vivoの肝細胞置換療法研究に移る予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Relationship between amyloid deposition and intracellular structural changes in familial amyloidotic polyneuropathy (2012)
  • 著者名/発表者名: Misumi Y, Ueda M, Obayashi K, Jono H, Su Y, Yamashita T, Ohshima T, Ando Y, Uchino M
  • 雑誌名: Hum Pathol 巻: 43 ページ: 96-104
  • 査読あり
• [雑誌論文] Long-term survival after liver transplantation in patients with familial amyloid polyneuropathy (2012)
  • 著者名/発表者名: Yamashita T
  • 雑誌名: Neurology 巻: 78 ページ: 637-43
  • DOI: 10.3892/or.2012.1684
  • 査読あり
• [雑誌論文] Aged vervet monkeys developing transthyretin amyloidosis with the human disease-causing Ile 122 allele : A valid pathological model of the human disease (2012)
  • 著者名/発表者名: Ueda M
  • 雑誌名: Lab Invest 巻: 92 ページ: 474-84
  • DOI: 10.1038/labinvest.2011.195
  • 査読あり
• [雑誌論文] The occurrence of islet amyloid polypeptide amyloidosis in Japanese subjects (2012)
  • 著者名/発表者名: Su Y
  • 雑誌名: Pancreas 巻: (掲載確定)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Antibody therapy for familial amyloidotic polyneuropathy (2012)
  • 著者名/発表者名: Su Y
  • 雑誌名: Amyloid 巻: (掲載確定)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of Heparin on Conformation of the β(2)-Microglobulin Molecule (2012)
  • 著者名/発表者名: Uji Y
  • 雑誌名: Ther Apher Dial 巻: 16 ページ: 159-62
  • DOI: 10.1111/j.1744-9987.2011.01039.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Potential use of Lactosylated Dendrimer (G3)/α-cyclodextrin conjugates as hepatocyte-specific siRNA carriers for the treatment of familial amyloidotic polyneuropathy (2012)
  • 著者名/発表者名: Hayashi Y
  • 雑誌名: Mol Pharm 巻: (掲載確定)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cyclodextrin, a novel therapeutic tool for suppressing amyloidogenic transthyretin misfolding in transthyretin-related amyloidosis (2011)
  • 著者名/発表者名: Jono H, Anno T, Motoyama K, Misumi Y, Tasaki T, Oshima T, Mori Y, Mizuguchi M, Ueda M, Shono M, Obayashi K, Arima H, Ando Y
  • 雑誌名: Biochem J 巻: 437 ページ: 35-42
  • 査読あり
• [雑誌論文] Amyloid neuropathy in a younger domino liver-transplanted recipient (2011)
  • 著者名/発表者名: Obayashi K, Yamashita T, Tasaki M, Ueda M, Shono M, Jono H, Ohshima T, Ohya Y, Asonuma K, Inomata Y, Ando Y
  • 雑誌名: Muscle Nerve 巻: 43 ページ: 449-450
  • 査読あり
• [雑誌論文] Blood pressure overshoot after tilt reversal in patients with familial amyloidotic polyneuropathy (2011)
  • 著者名/発表者名: Obayashi K, Hornsten R, Wiklund U, Karlsson M, Okamoto S, Ando Y, Suhr OB
  • 雑誌名: Hypertens Res 巻: 34 ページ: 133-138
  • 査読あり
• [雑誌論文] Wild-type transthyretin-derived amyloidosis in various ligaments and tendons (2011)
  • 著者名/発表者名: Sueyoshi T, Ueda M, Jono H, Irie H, Sei A, Ide J, Ando Y, Mizuta H
  • 雑誌名: Human Pathol 巻: 42 ページ: 1259-1264
  • 査読あり
• [雑誌論文] Spinal multifocal amyloidosis derived from wild-type transthyretin (2011)
  • 著者名/発表者名: Sueyoshi T, Ueda M, Sei A, Misumi Y, Oshima T, Yamashita T, Obayashi K, Shinriki S, Jono H, Shono M, Ando Y, Mizuta H
  • 雑誌名: Amyloid 巻: 18 ページ: 165-168
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinicopathological features of senile systemic amyloidosis : an ante- and post-mortem study (2011)
  • 著者名/発表者名: Ueda M
  • 雑誌名: Mod Pathol 巻: 24 ページ: 1533-1544
  • DOI: 10.1038/modpathol.2011.117
  • 査読あり
• [雑誌論文] Continuous development of arrhythmia is observed in Swedish transplant patients with familial amyloidotic polyneuropathy (amyloidogenic trans thyretin Val30Met variant) (2011)
  • 著者名/発表者名: Okamoto S
  • 雑誌名: Liver Transplant 巻: 17 ページ: 122-128
  • DOI: 10.1002/lt.22184
  • 査読あり
• [雑誌論文] Manifestations of Transthyretin-Related Familial Amyloidotic Polyneuropathy : Long-term Follow-up of Japanese Patients after Liver Transplantation (2011)
  • 著者名/発表者名: Ohya Y
  • 雑誌名: Surg Today 巻: 41 ページ: 1211-1218
  • DOI: 10.1007/s00595-010-4488-5
  • 査読あり
• [雑誌論文] Renal amyloidosis caused by apolipoprotein A-II without a genetic mutation in the coding sequence (2011)
  • 著者名/発表者名: Morizane R
  • 雑誌名: Clin Exper Nephorol 巻: 15 ページ: 774-779
  • DOI: 10.1007/s10157-011-0483-4
  • 査読あり
• [雑誌論文] Loss of functional albumin triggers acceleration of transthyretin amyloid fibril formation in familial amyloidotic polyneuropathy (2011)
  • 著者名/発表者名: Kugimiya T
  • 雑誌名: Lab Invest 巻: 91 ページ: 1219-1228
  • DOI: 10.1038/labinvest.2011.71
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparison of quantitative sensory testing and heart rate variability in Swedish Val30Met ATTR (2011)
  • 著者名/発表者名: Heldestad Y
  • 雑誌名: Amyloid 巻: 18 ページ: 183-190
  • DOI: 10.3109/13506129.2011.614294
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hereditary Gelsolin Amyloidosis : A New Japanese Case with Cutis Laxa as a Diagnostic Clue (2011)
  • 著者名/発表者名: Asahina A
  • 雑誌名: Acta Derm Venereol 巻: 91 ページ: 201-203
  • DOI: 10.2340/00015555-1011
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sensorimotor manifestations without autonomic symptoms in two siblings with TTR Val107 familial amyloid polyneuropathy (2011)
  • 著者名/発表者名: Asahina M
  • 雑誌名: Clin Neurol Neurosurg 巻: 113 ページ: 139-141
  • DOI: 10.1016/j.clineuro.2010.08.018
  • 査読あり
• [雑誌論文] 家族性アミロイドポリニューロパチー(FAP)に対する肝移植の有用性と限界 (2011)
  • 著者名/発表者名: 安東由喜雄
  • 雑誌名: 臨床神経 巻: 51 ページ: 1138-1141
  • DOI: 10.5692/clinicalneurol.51.1138
• [雑誌論文] 内科医が知っておくべき検査の最新情報:臨床検査の進歩注目される新しい検査を中心に (2011)
  • 著者名/発表者名: 安東由喜雄
  • 雑誌名: 日本内科学会雑誌 巻: 100 ページ: 3276-3283
  • DOI: 10.5692/clinicalneurol.51.1138
• [雑誌論文] 家族性アミロイドポリニューロパチー (2011)
  • 著者名/発表者名: 山下太郎
  • 雑誌名: BRAIN and NERVE 巻: 63 ページ: 583-595
  • DOI: 10.5692/clinicalneurol.51.1138
• [学会発表] 石巻に行って考えたこと,地域防災啓発シンポジウム「-東北大震災から学ぶ-」 (2011)
  • 著者名/発表者名: 安東由喜雄
  • 学会等名: 熊本市防災関係機関連絡協議会
  • 発表場所: 崇城大学市民ホール、熊本(招待講演)
  • 年月日: 2011-11-30
• [学会発表] 栄養アセスメントータンパク質の有効な活用法とピットフォール (2011)
  • 著者名/発表者名: 安東由喜雄
  • 学会等名: 熊本栄養・代謝フォーラム
  • 発表場所: エルセルモ熊本、熊本(招待講演)
  • 年月日: 2011-09-30
• [学会発表] 臨床検査のエビデンスを見直す (2011)
  • 著者名/発表者名: 安東由喜雄
  • 学会等名: 第22回日本臨床化学会東海北陸支部総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場、名古屋(招待講演)
  • 年月日: 2011-08-06
• [学会発表] 東北震災の支援を考える (2011)
  • 著者名/発表者名: 安東由喜雄
  • 学会等名: 第13回臨床検査標準化研修会
  • 発表場所: 熊本保健科学大学・50周年記念館、熊本(招待講演)
  • 年月日: 2011-07-02
• [学会発表] 肝移植によらないアミロイドーシスの治療戦略,シンポジウム「アミロイドーシスとセルピノパチー」 (2011)
  • 著者名/発表者名: 安東由喜雄
  • 学会等名: 第12回日本薬学会生物系薬学部会
  • 発表場所: 富山国際会議場、富山(招待講演)
  • 年月日: 2011-06-18
• [学会発表] 検査カフェと臨床検査科,シンポジウム「臨床検査科はどうなった?～実践施設の検査専門医に聞く～」 (2011)
  • 著者名/発表者名: 安東由喜雄
  • 学会等名: 第21回日本臨床検査医会
  • 発表場所: アイーナ(いわて県民情報交流センター)、盛岡(招待講演)
  • 年月日: 2011-06-11
• [学会発表] 家族性アミロイドポリニューロパチーの肝移植の効果とその問題点 (2011)
  • 著者名/発表者名: 安東由喜雄
  • 学会等名: 第51回日本神経学会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場、名古屋(招待講演)
  • 年月日: 2011-05-18
• [学会発表] FAP treatment guide line-farming the issue (2011)
  • 著者名/発表者名: Ando Y
  • 学会等名: Tafamidis Meeting
  • 発表場所: The Affinia Shelburne Hotel, New York, USA(招待講演)
  • 年月日: 2011-05-06
• [学会発表] Familial amyloidotic polyneuropathy, recent news (2011)
  • 著者名/発表者名: Ando Y
  • 学会等名: 2011 Shanghai Jiao Tong University International Neurological Diseases Symposium
  • 発表場所: 上海市交通大学・医学院附属瑞金医院、Shanghai, China(招待講演)
  • 年月日: 2011-04-22
• [図書] 今日の治療指針2012(タイトル)アミロイドニューロパチー (2012)
  • 著者名/発表者名: 安東由喜雄
  • 総ページ数: 801-802
  • 出版者: 医学書院
• [図書] 遺伝子分析学日本遺伝子検査同学院編集(タイトル)遺伝子・染色体検査業務 (2011)
  • 著者名/発表者名: 安東由喜雄
  • 総ページ数: 237-240
  • 出版者: 克誠堂出版
• [図書] アミロイドーシス診療のすべて(タイトル)家族性アミロイドポリニューロパチー (2011)
  • 著者名/発表者名: 安東由喜雄
  • 総ページ数: 71-86
  • 出版者: 医歯薬出版
• [図書] Annual Review神経(タイトル)家族性アミロイドポリニューロパチー(FAP)の肝移植と新たな治療法の開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 安東由喜雄
  • 総ページ数: 310-317
  • 出版者: 中外医学社