| 研究課題/領域番号 |
21390296
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| 研究機関 | 自治医科大学 |
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研究代表者 |
小澤 敬也 自治医科大学, 医学部, 教授 (30137707)
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| 研究分担者 |
卜部 匡司 自治医科大学, 医学部, 講師 (40213516)
内堀 亮介 自治医科大学, 医学部, 助教 (20458285)
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| キーワード | 間葉系幹細胞 / 癌 / 遺伝子治療 / 移植再生医療 / ゲノム |
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| 研究概要 |
間葉系幹細胞(MSC)を利用した遺伝子治療法の開発研究を行った。第1に、MSCが腫瘍集積性を有することに着目し、癌遺伝子治療のプラットホームとしてMSCを利用する治療戦略を開発した。即ち、抗腫瘍性サイトカインを発現するヒトMSCを担癌ヌードマウスに血管内投与し、生存期間の延長を図る遺伝子治療モデル実験を行った。抗腫瘍性サイトカインとしては可溶型TRAIL[sTRAIL; soluble TNF-related apoptosis-inducing ligand]を使用した。この分子中にイソロイシンジッパードメインの配列を付加して効率的且つ安定的な三量体形成を図ることによって殺腫瘍細胞効果が増強されることを確認した。さらに、HDAC阻害剤であるTSAの併用によって、TRAIL受容体の発現亢進を介して腫瘍細胞のTRAIL感受性を高めることができた。ヒト大腸癌細胞を皮下接種した担癌マウスの治療実験では、sTRAIL発現MSCとTSAの併用によって腫瘍の増殖抑制が観察された。また、この治療実験の結果から、MSCがより集積しやすい腫瘍ほど治療効果が高いことが示された。
第2に、MSCを用いた再生医療/細胞治療の有効性を高めるには遺伝子操作を絡める必要があり、その安全性を確保するための染色体部位特異的遺伝子組込み法の基盤研究を行った。即ち、野生型アデノ随伴ウイルス(AAV)のゲノムが第19番染色体長腕AAVS1領域に組み込まれる性質を利用し、AAVS1特異的遺伝子組込み法の開発研究を行った。今年度は、導入遺伝子のサイレンシングを抑制する目的でトリβグロビンもしくはc-mycのインスレーター配列を搭載したGFP/薬剤耐性遺伝子プラスミドを293細胞に導入し、薬剤耐性コロニー数を比較したところ、インスレーター非搭載プラスミドと比べて両者とも有意差はなかった。
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