骨髄由来の間葉系幹細胞を利用した遺伝子治療法の開発

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 21390296
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 小澤 敬也 自治医科大学, 医学部, 教授 (30137707)
• 研究分担者: 卜部 匡司 自治医科大学, 医学部, 講師 (40213516) ; 内堀 亮介 自治医科大学, 医学部, 助教 (20458285)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2011
• キーワード: 間葉系幹細胞 / 癌 / 遺伝子治療 / 移植再生医療 / ゲノム

研究概要

間葉系幹細胞(MSC)を利用した遺伝子治療法の開発研究を行った。第1に、MSCが腫瘍集積性を有することに着目し、担癌ヌードマウスを用いたモデル実験でそのメカニズムを調べ、癌遺伝子治療のプラットホームとしてMSCを用いる際に有用な知見を得た。第2に、MSCの遺伝子操作の際の安全性を確保するため、アデノ随伴ウイルスの19番染色体AAVS1領域特異的ゲノム組込み機構を利用した遺伝子導入法の基盤研究を行った。

研究成果

• [雑誌論文] Interleukin-10 expression induced by adeno-associated virus vector suppresses proteinuria in Zucker obese rats (2012)
  • 著者名/発表者名: Ogura M, Urabe M, Akimoto T, Onishi A, Ito C, Ito T, Tsukahara T, Mizukami H, Kume A, Muto S, Kusano E, and Ozawa K.
  • 雑誌名: Gene Ther 巻: 19巻 ページ: 476-82
  • DOI: DOI:10.1038/gt.2011.183.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recovery of neurogenic amines in phenylketonuria mice after liver-targeted gene therapy (2012)
  • 著者名/発表者名: Yagi H, Sanechika S, Ichinose H, Sumi-Ichinose C, Mizukami H, Urabe M, Ozawa K, Kume A
  • 雑誌名: Neuroreport 巻: 4巻 ページ: 30-4
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of a mouse model for lymph node metastasis with endometrial cancer (2011)
  • 著者名/発表者名: Takahashi K, Saga Y, Mizukami H, Takei Y, Urabe M, Kume A, Suzuki M, and Ozawa K
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 102巻 ページ: 2272-7
  • DOI: DOI:10.1111/j.1349-7006.2011.02099.x.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lack of IL-21 signal attenuates graft-versus-leukemia effect in the absence of CD8 T-cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Meguro A, Ozaki K, Hatanaka K, Oh I, Sudo K, Ohmori T, Matsu H, Tatara., Sato K, Sakata Y, Nakae S, Leonard W J, and Ozawa K
  • 雑誌名: Bone Marrow Transplant 巻: 46巻 ページ: 1557-1565
  • DOI: DOI:10.1038/bmt.2010.342.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mesenchymal stromal cells inhibit Th17 but not regulatory T-cell differentiation (2011)
  • 著者名/発表者名: Tatara R, Ozak K., Kikuchi Y, Hatanaka K, Oh I, Meguro A, Matsu H, Sato K, and Ozawa K
  • 雑誌名: Cytotherapy 巻: 13巻 ページ: 686-694
  • 査読あり
• [雑誌論文] Complete restoration of phenylalanine oxidation in phenylketonuria mouse by a self-complementary adeno-associated virus vector (2011)
  • 著者名/発表者名: Yagi H, Ogura T, Mizukami H, Urabe M, Hamada H, Yoshikawa H, Ozawa K and Kume A
  • 雑誌名: J. Gene Med 巻: 13巻 ページ: 114-122
  • DOI: DOI:10.1002/jgm.1543.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Altered effector CD4+T cell function in IL-21R-/-CD4+T cell-mediated graft-versus-host disease (2010)
  • 著者名/発表者名: Oh I, Ozaki K, Meguro A, Hatanaka K, Kadowaki M, Matsu H, Tatara R, Sato K, Iwakura Y, Nakae S, Sudo K, Teshima T, Leonard W J and Ozawa K
  • 雑誌名: J. Immunol 巻: 185巻 ページ: 1920-1926
  • 査読あり
• [雑誌論文] IL-21 is critical for GVHD in a mouse model (2010)
  • 著者名/発表者名: Meguro A, Ozaki K, Oh I, Hatanaka K, Matsu H, Tatara R, Sato. K, Leonard W J and Ozawa K
  • 雑誌名: Bone Marrow Transplant 巻: 45巻 ページ: 723-729
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mutant Macaque Factor IX T262A : A Tool for Hemophilia B Gene Therapy Studies in Macaques (2010)
  • 著者名/発表者名: Ishiwata A, Mimuro J, Mizukami H, Kashiwakura Y, Yasumoto A, Sakata A, Ohmori T, Madoiwa S, Ono F, Shima M, Yoshioka A, Ozawa K, Sakata Y
  • 雑誌名: Thromb Res 巻: 125巻 ページ: 533-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Characterization of a Recombinant Adeno-Associated Virus Type 2 Reference Standard Material (2010)
  • 著者名/発表者名: Lock M, McGorray S, Auricchio A, Ayuso E, Beecham E J, Blouin V, Bosch F, Bose M, Byrne B, Caton T, Chiorini J, Chtarto A, Clark K R, Conlon T, Darmon C, Doria M, Douar A M, Flotte T R, Francis J, Francois A, Giacca M., Korn M., Korytov I, Leon X, Leuchs
  • 雑誌名: Human Gene Therapy 巻: 21巻 ページ: 1723-85
  • 査読あり
• [雑誌論文] A phase I study of aromatic L-amino acid decarboxylase gene therapy for Parkinson's disease (2010)
  • 著者名/発表者名: Muramatsu S, Fujimoto K, Kato S, Mizukami H, Asari S, Ikeguchi K, Kawakami T, Urabe M, Kume A, Sato T, Watanabe E, Ozawa K, Nakano I
  • 雑誌名: Mol Ther 巻: 18巻 ページ: 1731-5
  • 査読あり
• [雑誌論文] Gene therapy for Parkinson's disease. Strategies for the local production of dopamine (2010)
  • 著者名/発表者名: Muramatsu S, Asari S, Fujimoto K, Ozawa K and Nakamo I.
  • 雑誌名: Gene Therapy & Regulation 巻: 5巻 ページ: 57-65
  • 査読あり
• [雑誌論文] Establishment and characterization of transplantable, luminescence labeled rat renal cell carcinoma cell lines (2010)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi M, Murakami T, Uchibori R, Chun NA, Kobayashi E, Morita T, Ozawa K.
  • 雑誌名: J Urol 巻: 183巻 ページ: 2029-2035
  • 査読あり
• [雑誌論文] Liver-restricted expression of the canine factor VIII gene facilitates prevention of inhibitor formation in factor VIII-deficient mice (2009)
  • 著者名/発表者名: Ishiwata A, Mimuro J, Mizukami H, Kashiwakura Y, Takano K, Ohmori T, Madoiwa S, Ozawa K and Sakata Y
  • 雑誌名: J. Gene Med 巻: 11巻 ページ: 1020-1029
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of adeno-associated virus vector enabling functional expression of oxytocin receptor and fluorescence marker genes using the human eIF4G internal ribosome entry site element (2009)
  • 著者名/発表者名: Sato K, Date S, Aoyagi Y, Kasahara Y, Nawa A, Mizukami H, Hidema S, Ozawa K, Nishimori K
  • 雑誌名: Biosci. Biotechnol. Biochem 巻: 73巻 ページ: 2145-2148
  • 査読あり
• [雑誌論文] A convenient enzyme-linked immunosorbent assay for rapid screeningof anti-adeno-associated virus neutralizing antibodies (2009)
  • 著者名/発表者名: Ito T, Yamamoto S, Hayashi T, Kodera M, Mizukami H, Ozawa K, Muramatsu S.
  • 雑誌名: Ann. Clin. Biochem 巻: 46巻 ページ: 508-510
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cotransplantation with MSCs improves engraftment of HSCs after autologous intra-bone marrow transplantation in nonhuman primates (2009)
  • 著者名/発表者名: Masuda S, Ageyama N, Shibata H, Obara Y, Ikeda T, Takeuchi K, Ueda Y, Ozawa K., Hanazono Y
  • 雑誌名: Exp. Hematol 巻: 37巻 ページ: 1250-1257
  • 査読あり
• [雑誌論文] Scalable purification of adeno-associated virus serotype 1(AAV1) and AAV8 vectors, using dual ion-exchange adsorptive membranes (2009)
  • 著者名/発表者名: Okada T, Nonaka-Sarukawa M, Uchibori R, Kinoshita K, Hayashita-Kinoh H, Nitahara-Kasahara Y, Takeda S, and Ozawa K
  • 雑誌名: Hum. Gene Ther 巻: 20巻 ページ: 1013-1021
  • 査読あり
• [雑誌論文] Retroviral vector-producing mesenchymal stem cells for targeted suicide cancer gene therapy (2009)
  • 著者名/発表者名: Uchibori R, Okada T, Ito T, Mizukami H, Kume A and Ozawa, K
  • 雑誌名: J. Gene Med 巻: 11巻 ページ: 373-381
  • 査読あり
• [雑誌論文] Systemic delivery of IL-10 by an AAV vector prevents vascular remodeling and end-organ damage in stroke-prone spontaneously hypertensive rat (2009)
  • 著者名/発表者名: Nomoto T, Okada T, Shimazaki K, Yoshioka T, Nonaka-Sarukawa M, Ito T, Takeuchi K, Katsura K I, Mizukami H, Kume A, Ookawara S, Ikeda U, Katayama Y, and Ozawa K
  • 雑誌名: Gene Ther 巻: 16巻 ページ: 383-91
  • 査読あり
• [学会発表] The adeno-associated virus p5 promoter sequence mediated integration of transgene into the AAVS1 site (2011)
  • 著者名/発表者名: Urabe M
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜)
  • 年月日: 2011-12-13
• [学会発表] Synergistic effect on the tumor-killing activity of soluble TRAIL-expressing MSCs (2011)
  • 著者名/発表者名: Uchibori R
  • 学会等名: 第70回に本癌学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場(名古屋)
  • 年月日: 2011-10-04
• [学会発表] The p5 promoter of adeno-associated virus for AAVS1-specific integration (2011)
  • 著者名/発表者名: Urabe M
  • 学会等名: The XVth International Congress of Virology
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター(札幌)
  • 年月日: 2011-09-13
• [学会発表] The role of the p5 promoter of adeno-associated virus in AAVS1-directed integration (2011)
  • 著者名/発表者名: Urabe M
  • 学会等名: The 17th Annual Meeting of the Japan Society of Gene Therapy
  • 発表場所: 九州大学医学部百年講堂(福岡)
  • 年月日: 2011-07-17
• [学会発表] Trichostatin A sensitize apoptosis induced by soluble TRAIL-expressing MSCs (2011)
  • 著者名/発表者名: Uchibori R
  • 学会等名: The 17th Annual Meeting of the Japan Society of Gene Therapy
  • 発表場所: 九州大学医学部百年講堂(福岡)
  • 年月日: 2011-07-16
• [学会発表] The p5 promoter sequence of AAV genome regulates the direction of transgene insertion into the AAVS1 site (2011)
  • 著者名/発表者名: Urabe M
  • 学会等名: The 14th Annual Meeting of the American Society of Gene and Cell Therapy
  • 発表場所: The Washington State Convention Center(Seattle)
  • 年月日: 2011-05-21
• [学会発表] Enhancement of Tumor-Killing Activity of TRAIL-Expressing MSCs by Using Trichostatin A (2011)
  • 著者名/発表者名: Uchibori R
  • 学会等名: The 14th Annual Meeting of the American Society of Gene and Cell Therapy
  • 発表場所: The Washington State Convention Center(Seattle)
  • 年月日: 2011-05-20
• [学会発表] Analysis of cis elements required for AAVS1-specific integration of adeno-associated virus (2010)
  • 著者名/発表者名: Urabe M
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド(神戸)
  • 年月日: 2010-12-07
• [学会発表] アデノ随伴ウイルスの部位特異的組込み機構の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: Urabe M
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会学術総会
  • 発表場所: あわぎんホ-ル(徳島)
  • 年月日: 2010-11-09
• [学会発表] The effect of DMXAA(TNF-α inducer) on MSC accumulation at tumor sites (2010)
  • 著者名/発表者名: Uchibori R
  • 学会等名: 第16回日本癌学会総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪)
  • 年月日: 2010-09-24
• [学会発表] Mesenchymal stem cells as a cellular vehicle for cancer-targeted gene therapy (2010)
  • 著者名/発表者名: Uchibori R
  • 学会等名: The 16th Annual Meeting of the Japan Society of Gene Therapy
  • 発表場所: 栃木県総合文化センター(宇都宮)
  • 年月日: 2010-07-02
• [学会発表] Editing cis elements required for AAV integration to enhance AAVS1-targeted integration (2010)
  • 著者名/発表者名: Urabe M
  • 学会等名: The 16th Annual Meeting of the Japan Society of Gene Therapy
  • 発表場所: 栃木県総合文化センター(宇都宮)
  • 年月日: 2010-07-01
• [学会発表] The effect of DMXAA(56-dimethylxanthenone-4-acetic acid) on MSC accumulation in tumor sites (2010)
  • 著者名/発表者名: Uchibori R
  • 学会等名: The 16th Annual Meeting of the Japan Society of Gene Therapy
  • 発表場所: 栃木県総合文化センター(宇都宮)
  • 年月日: 2010-07-01
• [学会発表] NF-κB activity regulates MSC accumulation at tumor sites (2010)
  • 著者名/発表者名: Uchibori R
  • 学会等名: The 13th Annual Meeting of the American Society of Gene Therapy
  • 発表場所: Marriott Wardman Park Hotel(Washington, D. C.)
  • 年月日: 2010-05-20
• [学会発表] Mechanism of MSC(mesenchymal stem/stromal cell) accumulation at the sites of tumors (2009)
  • 著者名/発表者名: Uchibori R
  • 学会等名: The 14th Congress of the European Hematology Association
  • 発表場所: Germany
  • 年月日: 20090600
• [学会発表] Mesenchymal stem cells(MSCs) as a platform for cancer gene therapy (2009)
  • 著者名/発表者名: Uchibori R
  • 学会等名: 第71回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 国立京都国際会館(京都)
  • 年月日: 2009-10-23
• [学会発表] VCAM-1 expression following TNF-alpha stimulation is required, for tumor tropism of mesenchymal stem cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Uchibori R
  • 学会等名: 第68回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜)
  • 年月日: 2009-10-03
• [学会発表] Cancer-targeted gene therapy using MSCs as a platform (2009)
  • 著者名/発表者名: Uchibori R
  • 学会等名: Annual Meeting of the International Society for Cell and Gene Therapy of Cancer
  • 発表場所: Ireland
  • 年月日: 2009-09-03
• [学会発表] Mechanism of MSC(Mesenchymal stem/stromal cell) accumulation at tumor sites (2009)
  • 著者名/発表者名: Uchibori R
  • 学会等名: The 15th Annual Meeting of the Japan Society of Gene Therapy
  • 発表場所: 大阪大学コンベンションセンター(大阪)
  • 年月日: 2009-07-11
• [学会発表] Roles of inflammatory cytokines in tumor tropism of mesenchimal stromal cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Uchibori R
  • 学会等名: The 12th Annual Meeting of the American Society of Gene Therapy
  • 発表場所: San Diego Convention Center(San Diego)
  • 年月日: 2009-05-28