| 研究課題/領域番号 |
21390306
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| 研究機関 | 北里大学 |
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研究代表者 |
高橋 孝 北里大学, 大学院・感染制御科学府, 教授 (00292855)
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| 研究分担者 |
石垣 靖人 金沢医科大学, 医学部, 講師 (20232275)
村山 次哉 北陸大学, 薬学部, 教授 (60159184)
高野 文英 金沢大学, 薬学部, 准教授 (20236251)
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| キーワード | ウイルス / 感染症 / 脂質 / 免疫学 / 遺伝子 |
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| 研究概要 |
(1) ヒトサイトメガロウイルス(hCMV)感染細胞を用いたスタチン作用に関わる遺伝子/転写産物レベルの網羅的な解析と候補分子の関与度:ヒト胎児肺線維芽(HEL)細胞とhCMV (Towne株)・スタチン(mevastatin-1.0μM)との共培養を行い、ヒトおよびhCMV遺伝子を搭載したDNAチップを用いて、感染後9時間-24時間-48時間におけるヒト由来およびウイルス由来の遺伝子群の発現変動を網羅的に解析した。その結果、感染前初期⇒後期の全工程を通じプラセボと比較して10倍以上発現が亢進したヒト遺伝子群として、ケモカイン・リガンド(CXCL11, CCL2など)やインターフェロン応答性蛋白質(IFI44, IFIT2など)が確認され、1/10倍以上発現が抑制した宿主遺伝子群は認められなかった。一方、プラセポと比較して1/10倍以上発現が低下したウイルス遺伝子群として、複製の前初期段階に関わる調節蛋白質であるUL37や感染前初期の遺伝子発現を活性化するUL28が見られ、10倍以上発現が増加したウイルス遺伝子群は確認されなかった。RT-PCR法にて上記の選定遺伝子の再現性・定量性を確認した後、宿主のケモカイン・リガンドであるCXCLllがsiRNAにより事前に発現抑制されたHEL細胞を用いて再度感染・共培養を実施したところ、スタチンが有する抗ウイルス作用が減弱された。以上より、スタチンのhCMV複製抑制は宿主におけるケモカイン・リガンドの遺伝子発現増加を介して発揮される可能性が示唆された。
(2) インフルエンザウイルス(Flu)感染細胞を用いたスタチンの抗ウイルス効果の検証:イヌ腎(MDCK)細胞とFlu(PR8株/AG株)・スタチン(mevastatin-1.0μM)との共培養にて、感染後12時間における培養上清中のウイルス産生量の低下が確認された。現在、イヌおよびFlu遺伝子を搭載したDNAチップを用いて宿主由来およびウイルス由来の遺伝子発現の網羅的解析を実施しており、候補遺伝子の選定やその機能を確認する予定である。
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